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情境一:采样及处理 任务一:样品的处理和制备方法 知识点:样品的处理和制备 课程:微生物检验技术 样品的处理和制备 1. 液体样品的处理 液体样品,即粘度不超过牛乳的非粘性食品,可直接由灭菌吸管准确吸取25mL,置于蒸馏水、生理盐水及有关检验的增菌液中,制成1:10的稀释液。吸取前要将样品充分混合,在开瓶、开盖等打开样品容器时,一定要注意表面消毒,无菌操作。用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌,用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好,再用灭菌开瓶器将盖启开。含有二氧化碳的样品可倒入灭菌的小瓶内,覆盖灭菌纱布,轻轻摇荡,待气体全部逸出后,再取样检验。 一、样品的处理和制备 2.固体或粘性液体样品的处理 此类样品无法用吸管吸取,可用灭菌容器称取检样25g,加入预温45℃的灭菌生理盐水或蒸馏水225mL中,摇荡融化或用振荡器振荡融化,尽快检验。从样品稀释到接种培养一般不超过15min。 3.固体食品的处理 固体食品的处理相对复杂,处理方法主要有以下几种: ①碎均质法 将样品(≥100g)剪碎或搅拌混匀,从中取25g放入带225mL无菌稀释液的无菌均质杯中,以8000~10000r/min均质1~2min即可。 ②剪碎振摇法 将样品(≥100g)剪碎或搅拌混匀,从中取25g检样进一步剪碎,放入带225mL无菌稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中,盖紧瓶盖,用力快速振摇50次,振幅不小于40cm。 ③研磨法 将样品(≥100g)剪碎或搅拌混匀,从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后,再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中,盖紧,充分摇匀。 ④整粒振摇法 有完整自然保护膜的颗粒状样品,如蒜瓣、青豆等,可以直接称取25g整粒样品置于带有225mL无菌稀释液和适量玻璃珠的无菌稀释瓶中,盖紧瓶盖,用力快速振摇50次,振幅要大于40cm以上。 4.冷冻样品 冷冻样品在检验前要进行解冻。一般在0~4 ℃下解冻,时间不能超过18h;也可在45℃下解冻,时间不能超过15min。样品解冻后,无菌操作称取检样25g,置于225mL无菌稀释液中,制成1:10稀释液。 5.粉状或颗粒状样品的处理 用灭菌勺或其他适用工具将样品搅拌均匀后,无菌操作称取检样25g,置于225mL灭菌生理盐水中,充分振摇混匀或使用振摇器混匀,制成1:10稀释液。
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