鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备.docVIP

第21卷5期 中 国 病 毒 学 21（5）：477-480 收稿日期：2006-03-20， 修回日期：2006-06-30 作者简介：王晓艳（1977-），女，博士研究生，从事动物病毒分子生物学与分子免疫学研究。 ** 通讯作者：王笑梅（1962-），女，博士，研究员，主要从事禽免疫抑制病研究。 Corresponding author: Tel: 0451 E-mail: xmw@ 478 中 国 病 毒 学 第21卷 白，即VP1、VP2和VP3。其中VP1为病毒的主要衣壳蛋白，存在于高度纯化的病毒颗粒上，其N末端含大量碱性氨基酸，与组蛋白有一定相似性[2]，作为病毒的主要结构蛋白，VP1在刺激机体产生中和抗体方面起重要作用，但是Koch等人[3]研究发现VP1只有与VP2共同表达时，才可以刺激机体产生中和抗体，由于在纯化的病毒颗粒中只有VP1，GCTGCGTC -3’，其5’端设计有Kpn I位点，其中上游引物起始于vp1基因的202bp处，扩增片段长度为1149bp, 引物由大连宝生物公司合成。 1.3 目的基因的获取 以pPro-VP1质粒为模板，用引物1BU、1BL以两步法进行扩增，扩增后产物用琼脂糖凝胶试剂盒未发现VP2的存在，所以人们推测VP1的表位以构象型表位为主，而VP2只是辅助VP1折叠形成正确的构象。利用现有的具有中和活性的单