基因工程原理杨红.pptxVIP

基因工程原理;第四章 目的基因的分离与修饰;一个能转录、翻译的结构基因依次包括：;第一节 基因的基本结构特征;原核生物基因启动区的结构;乳糖操纵子模型;二、真核生物基因的组成;三、其它基因组的基因组成;四、基因的排列;重复基因：重复基因指染色体上存在多数拷贝基因，重复基因往往是生命活动最基本，最重要的功能相关的基因。;第二节 基因组文库;1. 基因组文库的大小 ——是指文库中的克隆子数量。;1976年，Clark等提出估算克隆子数的公式。 N=ln（1-P）/ ln（1-f） N：基因组文库必需的克隆数目 P：文库中目的基因出现的概率（99%） f：插入片段大小于基因组大小的比值 例如上面例子： N=ln（1-0.99）/ ln（1-15/ 3×106）= 9×105个;与基因组大小成正比 与克隆的DNA片段大小成反比 与载体的容量有关： 某一生物如果用质粒作载体需要900万个克隆， 用λ噬菌体需要90万个克隆， 用cosmid作载体需要35万个克隆。;2. 用于构建DNA文库的克隆载体;（1）制备基因组DNA并片段化;;+;;;二、真核生物基因组文库的构建;;;三、 cDNA基因文库的构建;1. cDNA文库的