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遗传学实验 山东大学 生命科学学院 13 级临八 模式植物拟南芥T-DNA 插入突变体的鉴定 摘要 当农杆菌侵染植物细胞时，土壤农杆菌的天然质粒—Ti 质粒上T-DNA 区段能自发转 移进植物细胞，并插入染色体DNA 中。拟南芥的T-DNA 插入变异是反向遗传学进行植物生 物学研究的重要手段之一，在获得的Ti 质粒转化植物细胞后代分离群体中，有T-DNA 插入 的纯合突变体，杂合突变体，和野生型，在突变体研究中，需要的材料是纯合突变体，所 以必须从分离群体中将纯合突变体鉴定出来。本实验以拟南芥植株的特定基因突变体作为 实验材料，提取DNA，并通过PCR 扩增及SDS电泳分离检测鉴定，检测该拟南芥是否 为转基因的拟南芥，并判断其是纯合突变还是杂合突变。本次实验目的在于了解拟南芥 T-DNA 插入突变体鉴定的原理，掌握DNA 提取技术、PCR 技术以及电泳鉴定技术，对拟南芥 的基因型做出判断。 关键词 T-DNA 插入突变体 拟南芥 PCR 琼脂糖凝胶电泳 1. 引言 1.1 遗传研究途径 （1）正向遗传学研究 杂交或诱变→表型观察→遗传规律→确定存在的基因及数目→基因的功能及作用性 质。 （2）反向遗传学研究