17.其它的分子诊断检测技术2013-12-19.ppt

举例:Bioluminescence-虫荧光素酶基因 通过重组DNA技术,构建含虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的重组分子 将之转入骨肉瘤细胞143B,构建稳定表达该酶的人骨肉瘤细胞株143B-LUC 用143B-LUC注入动物皮下成瘤 观察前,腹腔注射D-Luciferin,一定时间后通过micro-CT 观察 D-Luciferin 作为荧光素酶的底物。在ATP和荧光素酶的催化作用下,Luciferin被氧化,产生蓝绿色的光(560nm),当底物过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常用报告基因。由于没有背景干扰,因此可以很容易地检测出低至 0.02 pg水平的荧光素酶。 3)光学成像技术优缺点 优点:该技术操作简单、无放射性、所得结果直观、灵敏度高,目前已广泛应用于生命科学及医药研究 缺点:光学成像技术的穿透力有限,为数毫米-数厘米,只能用于皮肤浅表成像,因此该技术目前主要用于小动物模型的研究 不同成像方法的相关参数 成像方法 探测 光谱 空间 分辨率 检测 深度 时间 分辨率 灵敏度(mol/L) 探针 浓度 PET 高能γ射线 1-2 mm No limit 10 s-min 10-11~10-12 ng SPECT 低能γ射线 0.

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