基因芯片的产生背景与制备手册.pptVIP

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2019-12-25 发布于江苏
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基因芯片的产生背景与制备手册.ppt

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;基因芯片概况;定义; 样品核酸分子可以用同位素法、化学荧光法、酶标法标记，与固定在载体上的DNA阵列中的点同时杂交，用激光或CCD摄像头扫描仪读取数据，计算机图像处理系统进行数据分析，以达到其准确、快速、高效和高通量地分析生物基因信息的目的。 ;基因芯片的产生背景;;;基因芯片的制备方法;;基因芯片技术流程;一、制备基因芯片 1、靶基因的获得细胞或组织mRNA?cDNA文库?PCR扩增?各种基因序列 2、芯片基质的选择及活化载玻片?表面涂氨基硅烷或多聚赖氨酸 3、点样仪点样;二、制备样本核酸探针 1、样本总RNA的抽提：异硫氰酸胍 2、mRNA的分离与纯化：oligo－dT 3、反转录并标记随机引物法逆转录标记物：同位素、荧光染料(cy3-绿色/cy5－红色)、化学发光;三、杂交实验条件;四、杂交信号的检测 1、激光共聚焦扫描光源：特定波长的光激发面积：100?m2 ScanArray 3000 2、CCD 成像术光源：连续波长的光（如弧光灯）激发面积：同时激发多个1cm2;五、芯片数据的处理和分析;;一、芯片测序;三、基因图谱绘制已知序列的基因多态性的探测及基因全序列的测定四、大规模基因表达平行性分析测定和识别细胞谱系和组织间有差异表达的基因，以及某项干预前后同一细胞差异表达的基因。;四、药物筛选;五、临床实验室诊断;六、微生物菌种鉴定及致病机制研究;七、生物芯片在农林业中的应用;八、军事、司法方面