CN102600463A鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗的生产方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102600463A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102600463 A (43)申请公布日 2012.07.25 (21)申请号 201110431081.7 (22)申请日 2011.12.21 (83)生物保藏信息 CGMCC No.4615 2011.02.25 CGMCC No.4614 2011.02.25 CGMCC No.5485 2011.11.22 (71)申请人 青岛易邦生物工程有限公司 地址 266032 山东省青岛市南京路369 号 (72)发明人 程增青 范根成 郭玉广 马爽 申洪银 刘东 胡潇 孙健 (74)专利代理机构 北京君智知识产权代理事务 所 11305 代理人 郑明 (51)Int.Cl. A61K 39/116 (2006.01) A61P 31/04 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 13 页 权利要求书1 页 说明书13 页 (54)发明名称 鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗的生产方法 (57)摘要 本发明涉及一种鸭传染性浆膜炎三价灭活疫 苗的生产方法。本发明所涉及的疫苗是采用免 疫原性良好的鸭疫里默氏杆菌1 型YBYN 株、2 型 YBSD 株和4 型YBRA04 株分别接种于适宜培养基， 收获培养物，经甲醛溶液灭活后，加入油佐剂混合 乳化制成。用于预防由1 型、2 型和4 型鸭疫里默 氏杆菌引起的鸭传染性浆膜炎。此疫苗具有安全 性好、免疫效力高且免疫期长等优点。 A 3 6 4 0 0 6 2 0 1 N C CN 102600463 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗，其特征是该疫苗含有经甲醛溶液灭活的鸭疫里 默氏杆菌1型YBYN 株菌、2 型YBSD 株菌和4 型YBRA04 株及常规的矿物油佐剂；鸭疫里默氏 杆菌1 型YBYN 株 (从云南省鸭场病死鸭的肝脏分离) 和2 型YBSD 株 (从山东省鸭场病死 鸭脑部分离) 已于2011 年2 月25 日、4 型YBRA04 株 (从山东省鸭场病死鸭心脏分离) 于 2011 年11月22 日分别送交北京市朝阳区北辰西路1号院3 号中国科学院微生物研究所中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号：YBYN 株为CGMCC No.4615、 YBSD 株为CGMCC No.4614 和YBRA04 株为CGMCC No.5485。 2. 权利要求1 一种鸭传染性浆膜炎三价灭活疫苗的生产方法，其特征在于： (1)采用机械搅拌发酵罐分别培养 1、2、4 型鸭疫里默氏杆菌CGMCC No.4615， CGMCCNo.4614 和CGMCC No.5485 株菌液：先将半合成肉汤培养基进行灭菌，待温度降至 37 ～38℃时，将2 ～8℃保存的二级种子液分别按2％～2.5％加入到发酵罐内。培养温度 控制在37 ～38℃，搅拌转速为100 ～200r/min，pH 为7.2，罐压为0.03 ～0.05Pa，溶氧量 为40％，培养9 ～10 小时收获，留样检验，置2 ～8℃保存，不超过5 日； (2)根据活菌计数结果，将灭活的 1、2、4 型鸭疫里默氏杆菌CGMCC No.4615， 10 CGMCCNo.4614 和CGMCC No.5485 株菌液均稀释成约3×10 CFU/ml 后等量混合；