分子生物-中心法则.pptVIP

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分子生物学-中心法则;;Reverse transcription;第19章 DNA复制与修复;氮标记技术证实了DNA的半保留复制 ;(深蓝: 15N);二)复制的方式和特点;;DNA的复制实际上就是以DNA为模板在DNA聚合酶作用下,将游离的四种脱氧三核苷酸(dATP,dGTP,dCTP,dTTP,简写为dNTP)聚合成DNA的过程。 这是一个非常复杂的酶促反应,需要许多种酶和蛋白质参与。;一、DNA复制所需原料;1、DNA聚合酶-复制的基本酶;原核细胞DNA聚合酶539;DNA-pol 的 5′?3′聚合作用;DNA-pol I 5′? 3′外切活性;小片段;引物酶(Primase);解除DNA高级结构的酶与蛋白:;3、解螺旋酶 (helicase);4、拓扑异构酶(topoisomerase,Topo); 消除复制叉前方形成的正超螺旋,即引入负超螺旋。切割DNA双链,此时不需ATP;尔后由ATP供能,连接切口。;5、DNA连接酶-连接DNA片断的酶;连接酶的催化反应;二、DNA复制过程(544);大肠杆菌的ori C;(2)DNA解旋,形成复制叉;起始: Ori C开始,形成复杂的引发体,合成RNA引物;2、延伸-酶催化以高速度进行;?;复制过程:两条链同时进行;滞后链的合成细节;3、终止;;第三节 真核生物DNA的复制;(1)真核细胞多复制起点;(2)真核生物DNA聚合酶;真核生物染色体DNA是线性的,每复制一次,子链的5’有缺失。 3’端有特殊的序列,是线性DNA末端复制必需的 ---端粒 作用:稳定染色体;线形DNA复制末端问题;端粒缩短;端粒酶(telomerase) ----防止端粒缩短的酶 组成 蛋白质(DNA聚合酶)+RNA(合成端粒DNA的模板) 唯一携带RNA模板的逆转录酶 人端粒酶: 模板(RNA-端粒酶):3’--(UCCCAA)n---5’ 合成(DNA): 5’--(AGGGTT)n---3’ 端粒酶和衰老、肿瘤有关;第四节 反转录;反转录酶的活性 ;RNA模板;;第五节 DNA的损伤修复;二、突变的类型;2. 缺失、插入和相应的框移突变;三、修复:;(二)切除修复;补充:PCR反应;PCR的过程

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