维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制血管平滑肌细胞钙化研究.pdfVIP

·３２９４· ·论著 · 维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制 血管平滑肌细胞钙化研究 李同妙，徐金升，冯 雨，张胜雷，张俊霞，崔立文，张慧然 　　 【摘要】　目的　探讨维拉帕米抑制高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞 （ＶＳＭＣｓ）钙化的作用及可能机制。方法　 ２０１４年１２月—２０１５年６月选取５～８周龄清洁级健康雄性ＳＤ大鼠６只，体外分离培养大鼠ＶＳＭＣｓ，采用免疫组化法 鉴定。将对数期ＶＳＭＣｓ随机分为正常对照组 〔含１０％胎牛血清 （ＦＢＳ）培养基〕、高磷组 （高磷培养基，含 １０ｍｍｌ／Ｌ β－甘油磷酸）、维拉帕米干预组 （在高磷培养基的基础上加入维拉帕米至浓度为２０ｍｍｏｌ／Ｌ）。细胞接受２、４、６ｄ干 预后，检测ＶＳＭＣｓ内钙离子水平，采用反转录 －聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测 ＶＳＭＣｓ内目的基因 （ｓｍａｄ１、ｒｕｎｘ２ ｍＲＮＡ）表达水平。细胞接受１４ｄ干预后进行钙化检测，包括钙水平测定和茜素红染色情况。结果　高磷组、维拉帕 米干预组２、４、６ｄ后ＶＳＭＣｓ内钙离子水平均高于正常对照组 （Ｐ＜００５）；维拉帕米干预组２、４、６ｄ后ＶＳＭＣｓ内钙 离子水平均低于高磷组 （Ｐ＜００５）。高磷组、维拉帕米干预组４、６ｄ后ＶＳＭＣｓ内钙离子水平分别高于２ｄ后 （Ｐ＜ ００５）；高磷组６ｄ后ＶＳＭＣｓ内钙离子水平高于４ｄ后 （Ｐ＜００５）；维拉帕米干预组６ｄ后ＶＳＭＣｓ内钙离子水平低于 ４ｄ后 （Ｐ＜００５）。高磷组、维拉帕米干预组２、４、６ｄ后ＶＳＭＣｓ内ｓｍａｄ１、ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达水平均高于正常对照组 （Ｐ＜００５）；维拉帕米干预组２、４、６ｄ后ＶＳＭＣｓ内ｓｍａｄ１、ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达水平均低于高磷组 （Ｐ＜００５）。高磷组 ４、６ｄ后ＶＳＭＣｓ内ｓｍａｄ１、ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达水平分别高于２ｄ后，６ｄ后ＶＳＭＣｓ内ｓｍａｄ１、ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达水平分别 高于４ｄ后 （Ｐ＜００５）；维拉帕米干预组４ｄ后ＶＳＭＣｓ内ｓｍａｄ１ｍＲＮＡ表达水平高于２ｄ后，ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达水平低 于２ｄ后，６ｄ后 ＶＳＭＣｓ内ｓｍａｄ１、ｒｕｎｘ２ｍＲＮＡ表达水平均高于２、４ｄ后 （Ｐ＜００５）。高磷组、维拉帕米干预组 ＶＳＭＣｓ钙水平均高于正常对照组 （Ｐ＜００５）；维拉帕米干预组ＶＳＭＣｓ钙水平低于高磷组 （Ｐ＜００５）。高磷组、维拉 帕米干预组橘红色钙化结节较正常对照组多，维拉帕米干预组橘红色钙化结节较高磷组少。结论　维拉帕米在高磷诱 导的ＶＳＭＣｓ钙化中起抑制作用，其可能是通过抑制钙离子内流进而抑制ｓｍａｄ１表达，进一步抑制ｒｕｎｘ２表达，进而抑 制ＶＳＭＣｓ发生表型转化来实现的。 　　 【关键词】　维拉帕米；肌细胞，平滑肌；血管钙化；钙通道 　　 【中图分类号】Ｒ３６４　 【文献标识码】Ａ　ｄｏｉ：１０３９６９／ｊｉｓｓｎ１００７－９５７２２０１５２７００８ 　　 李同妙，徐金升，冯雨，等维拉帕米通过阻断钙离子内流抑制血管平滑肌细胞钙化研究 ［Ｊ］．中国全科医学， ２０１５，１８（２７）：３２９４－３２９９［ｗｗｗｃｈｉｎａｇｐｎｅｔ］ 　　 ＬｉＴＭ，ＸｕＪＳ，ＦｅｎｇＹ，ｅｔａｌＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓｂｙｖｅｒａｐａｍｉｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅ ｂｌｏｃｋｉｎｇｏｆｔｈｅｉｎｗａｒｄｆｌｏｗｏｆｃａｌｃｉｕｍｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＧｅｎｅｒａｌＰｒａｃｔｉｃｅ，２０１５，１８（２７）：３２９４－３２９９ ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＶａｓｃｕｌａｒＳｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅＣｅｌｌｓｂｙＶｅｒａｐａｍｉｌＴｈｏｕｇｈｔｈｅＢｌｏｃｋｉｎｇｏｆｔｈｅＩｎｗａｒｄＦｌｏｗｏｆ ＣａｌｃｉｕｍＩｏｎ　ＬＩＴｏｎｇ－ｍｉａｏ，ＸＵＪｉｎ－ｓｈｅｎｇ，ＦＥＮＧＹｕ，ｅｔａｌＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｐｈｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＦｏｒｔｈＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｅｂｅｉ ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１１，Ｃｈｉｎａ 　　 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｖｅｒａｐａｍｉｌｏｎｔｈｅｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ（ＶＳＭＣｓ）ｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｙｐｅｒｐｈｏｓｐｈａｔｅ