凡纳滨对虾养殖群体的生长性能及遗传多样性研究-Xiamen.docxVIP

凡纳滨对虾选育系间杂交的生长性能及遗传多样性分析 吴怡迪1，骆轩1，杨章武2，黄永春3，游伟伟1* 厦门大学海洋与地球学院，福建 厦门 361102；2.福建省水产研究所，福建 厦门 361013；3. 集美大学水产学院，福建厦门 361021） 摘要：本研究对2个凡纳滨对虾选育系（A和B）的自繁与杂交后代的生长性能及遗传多样性进行了分析。养殖对比试验结果表明，杂交组合AB生长性能优于其他各组，表现出较好的杂种优势。使用11对荧光标记的微卫星引物对4个凡纳滨对虾自繁与杂交群体以及1个从美国引进的初代亲本群体的基因组DNA进行扩增，结果显示除AA群体外，其余4个群体均表现出较丰富的遗传多样性，观测到的平均等位基因数Na值为4.273~5.636，平均期望杂合度He值为0.586~0.887，平均多态信息含量PIC值为0.512~0.556。遗传距离分析结果显示，SIS群体和AA群体的遗传距离最远（0.6704），而SIS与AB群体的最近（0.1315）。研究结果表明，引自美国的凡纳滨对虾群体经多代自繁后，其遗传多样性水平降低；而选育系间杂交则可使杂交后代的生长性能和遗传多样性水平得到改善。 关键词：凡纳滨对虾；生长性能；遗传多样性；微卫星；杂交 中图分类号：S 917.4 文献标志码： A 凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）又名南美白对虾，原产自南太平洋和美洲沿海水域，自1988年引入我国以来，已成为我国水产养殖的支柱产业［1］。作为水产经济虾类的重要养殖品种，我国每年的凡纳滨对虾种苗需求量高达4000亿尾以上［2］。然而近年来由于各种虾类疾病相继入侵及养殖过程中的频繁近交而导致的种质退化等原因，我国凡纳滨对虾养殖过程中出收稿日期：2015-11-09 录用日期：2016-02-23基金项目：厦门市海洋经济创新发展区域示范项目（13PZY001SF25）*通讯作者：wwyou@xmu.edu.cn 收稿日期：2015-11-09 录用日期：2016-02-23 基金项目：厦门市海洋经济创新发展区域示范项目（13PZY001SF25） *通讯作者：wwyou@xmu.edu.cn 微卫星标记技术作为第二代分子标记的代表，已被广泛应用于水产生物的遗传分析研究中［3］。Maggioni等［4］用10个微卫星标记对巴西9个凡纳滨对虾养殖场的亲虾群体进行评估，结果显示9个亲虾群体的遗传多样性程度与来自中美洲的野生群体一致，处于较高的水平。Artiles等［5］用4个微卫星标记对古巴的1个凡纳滨对虾引进群体的不同世代进行遗传多样性分析，结果表明各后代群体的遗传多样性水平近似，但后代群体与基础群体间存在明显的遗传差异。此外还有一些研究用微卫星标记对凡纳滨对虾的遗传多样性进行分析［6-8］，发现随繁育世代增加，养殖群体后代的遗传多样性呈下降趋势，并建议在后续繁育工作中通过增加杂交来改善或避免近交衰退现象。 2008年起，厦门市厦兴龙水产种苗有限公司与福建省水产研究所等单位合作开展凡纳滨对虾良种选育工作。本研究针对该育种计划中的4个群体和1个美国引进群体，采用微卫星标记对其遗传结构和遗传多样性进行分析，从而监测该育种项目中各对虾群体的遗传变异情况。 1 材料与方法 实验材料 实验所用的2个选育群体以及2个杂交群体取自厦门市厦兴龙水产种苗有限公司，美国引进亲虾群体则引自美国SIS公司（Shrimp Improvement System, USA）。选育系A来源于2008年由美国SIS公司引进亲虾的子一代，选育系B来源于2010年引自广东的另一个凡纳滨对虾繁育群体，随后针对生长与抗病性状对2个群体进行了连续多代的群体选育。2014年，用选育系A的F6代群体以及选育系B的F4代群体作为亲本，采用双列杂交获得了两选育系的自繁及正、反杂交后代，并分别命名为AA（A♀×A♂），BB（B♀×B♂），AB（A♀×B♂,正交）和BA（B♀×A♂,反交）组合。五个凡纳滨对虾群体分别于2014年7～9月随机取样30尾，活体运回实验室后，用无菌手术剪和镊子取对虾尾节肌肉，保存于95%乙醇中备用。 实验方法 1.2.1 4个群体生长指标的跟踪测量 两选育系的自繁及正、反杂交后代的养殖对比试验于2014年7~11月在厦兴龙水产种苗有限公司的晋江基地进行。2014年7月31日，将每个交配组合的仔虾分别养在室外水泥池，每个水泥池6m2，投苗密度100尾/m2，每组设置2个对照池。养殖期间随对虾生长阶段进行定期投饵，并保持不间断充气。在养殖40，60，80和100日龄时对各群体对虾进行取样测量，每池取虾30尾，用游标卡尺（精确度0.01 mm）和电子天平（精确度0.01 g）对其体长、头胸甲长和体重3个指标进行测量并记录。 1.2.2 微卫星分析 1.