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- 2019-12-28 发布于广西
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RFLP检测 优点: 遍布于整个基因组,数量几乎是无限的 无表型效应,不受发育阶段及器官特异性限制 共显性,可区分纯合子和杂合子 结果稳定、可靠 缺点: 检测技术繁杂,成本较高,难以用于大规模的育种实践中 分析对样品纯度要求较高,样品需要量大 RFLP多态信息含量低 多态性水平过分依赖于限制性内切酶的种类和量 2. 可变串联重复多态性(varible number of tandem repeats, VNTR) 小卫星DNA(minisatellite DNA),第一代指纹技术(DNA fingeiprinting) 原理: 重复DNA小序列,10-70nt(核苷酸),拷贝10-1000,主要存在于染色体靠近端粒处。 多态性的原因 由于重复单位间不等交换,个体间存在串联数目的差异——拷贝数多态性 个体间在序列长度上差异——长度多态性,人群中的分布表现高度的个体特异性。 标记特点 与RFLP大致相同,但对限制性内切酶和探针有特殊的要求。 限制性内切酶的切点必须不在重复序列中,以保证小卫星序列的完整性。 内切酶在基因组的其他部位有较多的酶切位点,通过电泳检测多态性。 可充分显示长度重复序列片段的多态性。分子杂交所用DNA探针核苷酸序列必须是小卫星序列通过分子杂交和放射自显影后,就可一次性检测到众多小微卫星位点,得到个体特异性的DNA指纹图谱。 优点: 种类多,分布广,有高度多态性
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