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二.胚胎移植 4.胚胎移植的生理学基础 5.胚胎移植的意义 三.胚胎分割 干细胞的分类 * 史料1: 世界上第一例胚胎移植是由英国人W·希普于1890年完成的,胚胎移植技术由此创始。但当时纯属生物科学实验性质。希普在剑桥大学将纯种安哥拉兔的两具胚胎移植到一只已和同种交配、毛色特征完全不同的比利时兔的输卵管内。结果生出4只比利时仔兔和2只由胚胎发育而成的安哥拉仔兔。 20世纪30年代以后,以兔、小白鼠和大白鼠等为对象的胚胎移植试验持续不断,但家畜方面的应用研究开展较晚。 牛和猪的胚胎移植迟至1951年才分别由美国和苏联报道成功。但限于技术水平,当时的采卵和移植都用外科手术完成,60年代后,胎的收集、培养、冷冻长期保存以及显微外科操作和移植技术取得重要进展。 1978年7月25日,世界上第一个试管婴儿路易斯· 布朗在英国出生。她是由Steptoe和Edwards利用体外受精技术创造出的第一个试管婴儿。 据官方统计,英国1985~1995年间,诞生“试管婴儿”达2.2万名,成为治疗不育不孕症的重要手段之一。 第二节 胚胎工程 丽水第二高级中学 李成林 3.研究的重要内容(技术手段) : 2.研究的对象: 高等脊椎动物,特别是哺乳动物。 1.概念: 泛指在动物胚胎发育过程中所进行的各种胚胎操作技术。 胚胎工程 体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、 胚胎分割、胚胎干细胞培养 试管动物(如试管牛)技术—体外受精 精子+卵细胞 受精卵 早期胚胎 产生后代 一.体外受精和胚胎体外培养 体外受精 胚胎体外培养 体外受精和胚胎体外培养 良种雌性动物。 一般品种的雌性动物。 1.概念: 也称“借腹怀胎”。将经济价值较高、遗传性状优秀的母畜,经过激素处理,使其超数排卵后受精,然后将发育的早期胚胎分别移植到同期发情的代孕母的子宫内,通过代孕母妊娠产仔的技术。 2.供体: 提供胚胎的个体。受体:接受胚胎的个体。 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 取出早期胚胎 质量检查、培养 胚胎移植 妊娠检查 分娩(胚胎移植的犊牛) 3.胚胎移植的过程: 未配种 同期发情技术:主要是借助外源激素剌激卵巢,使其按照预定的要求发生变化,使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段,从而达到同期发情。 供体和受体(同一物种)相同的生理环境。 早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能。 受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥。 胚胎与受体建立正常的联系,但遗传物质没有改变。 加速育种工作和品种改良 大量节省购买种畜的费用 一胎多产 保存品种资源和濒危物种 可充分发挥优秀个体的繁殖潜能 缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量 胚胎移植 2.优势: 后代具有相同的遗传物质。 可成倍增加胚胎数量,可以快速繁殖良种畜。 3.特点: 4.选择的胚胎: [可看作是动物无性繁殖或克隆] 1.概念: 指借助显微操作技术(采用机械方法) 将早期胚胎切割成几等份, 再移植到代孕母子宫,产生同卵多仔后代的技术。 发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。 胚胎分割 四.胚胎干细胞 囊胚腔 囊胚 概念:简称ES或EK细胞, 是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团中分离出来的一类细胞. 特点: 1)形态:体积小,细胞核大,核仁明显. 2)功能:具有发育的全能性.可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.体外培养可增殖不分化. 3)在体外培养的条件下,ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存,也可以进行遗传改造。 1.胚胎干细胞的培养过程 培养过程: 1、 制备饲养层(胚胎成纤维细胞); 2、培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层; 3、酶消化或机械剥离内细胞团; 4、分为单个细胞 5、加饲养层培养。 (胚胎成纤维细胞) 培养关键:需要一种能促进胚胎干细胞的生长,但抑制其分化的一种培养体系。 胚胎干细胞的培养流程 2.胚胎干细胞核移植 概念: 将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中,经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 过程: 细胞核移植; 胚胎培养; 胚胎移植。 (1)全能干细胞:具有形成完整个体的分化潜能。 (2)多能干细胞:具有分化出多种细胞组织的潜能,失去发育成完整个体的能力。如胚胎干细胞(内细胞团)。 (3)单能干细胞:只能向一种类型或密切相关的两种类型分化的细胞。如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等。 (1)胚胎干细胞:当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团的细胞即为胚胎干细胞。 (2)成体干细胞:指已分化特定组织中的未分化细胞,可来
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