bf2肽四聚体的构建及其在特异性t细胞检测上的应用水.pdfVIP

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2020-01-10 发布于湖北
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bf2肽四聚体的构建及其在特异性t细胞检测上的应用水.pdf

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农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2009，17(1)：12-17 ·研究论文· BF2／肽四聚体的构建及其在特异性T细胞检测上的应用水刘光亮，王群，肖一红，童铁钢，白宇，孟庆文，吴东来奉幸 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室，哈尔滨150001) I类摘要：为构建可溶性鸡组织相容性复合体(MHC)I类分子(BF2)／肽复合物，大量表达并纯化了可生物素化的MHC 体复合物。将该单体复合物在体外进行生物素化，其产物再次采用FPLC通过分子筛分离出生物素化后的BF2／肽单体复合物；然后将生物素化后的BF2／肽单体复合物与藻红蛋白(PE)标记的链霉亲和素按一定比例反应生成BF2／肽四聚体。为了检测所 H52株10d后的SPF鸡分离外周血单核细胞(PBMC)，染制备BF2／肽四聚体是否能应用于检测特异性T细胞，从感染IBV 接种H52后10d时针对N蛋白的特异性T细胞比率为3．65％。关键词：BF2／肽四聚体；传染性支气管炎病毒；核蛋白；特异性T细胞中图分类号：S188文献标识码：A文章编号：1006．1304(2009)01．0012．06 Constructionofa TetramerandIts BF2／Peptide ontheDetectionof TCell Application Specific LIU Qun，XIAO Guang—liang，WANGYi—hong，TONGTie—gang， BAI Yu，MENGQing—wen，wuDong—lai料 Research ofVeterinary Institute， (NationalKeyLaboratory Bioteclmology,HarbinVeterinary Chjnese Sc向】ce$，Harbin150001，Cb抽a) AcademyofAgicultural theconstructionof amountofrecombinantchicken A鼬哪：For BF2／peptidetetramer，large majorhistocompatibilitycomplex chain were and a fromavianInfec— (MHC)Iheavychain(BF2-BSP)andlight Ch[32mexpressedpurified．Andpeptideoriginated and wererefoldedwithIBV ill tiousbronchitis