高等无机化学_无机合成与表征.pptVIP

差热分析(DTA)是在试样与参比物处于控制速率下进行加热或冷却的环境中，在相同的温度条件时，记录两者之间的温度差随时间或温度的变化，差示扫描量热分析(DSC)记录的则是在二者之间建立零温度差所需的能量随时间或温度的变化。 典型的DTA曲线和DSC曲线 上图是实验测得的CaC2O4·H2O的TG、DTG和DSC的联合曲线图，分别表示CaC2O4·H2O热分解时发生了三个吸热反应。其中，TG曲线显示的是试样的质量随温度的升高而发生的变化。DSC(或DTA)反映的是所测试样在不同的温度范围内发生的一系列伴随着热现象的物理或化学变化。 生物大分子的分子量测定 蛋白质分子量的测定 蛋白质类生物大分子分子量的测定有着十分重要的意义，如对均一蛋白质一级结构的测定有促进意义。 常规的分子量测定主要有渗透压法、光散射法、超速高心法等。 简单计算： 从图中可以看出同时出现了8＋～23＋电荷态，并且表明P1＝1542,P2＝1696。用联立方程可算出肌红朊的分子量： 实际上计算机可直接得到表明电荷态与分子量的质谱图。 生物质谱在蛋白质组学中的应用 电喷雾质谱技术和基质辅助激光解吸附质谱技术是诞生于80年代末期的两项轨电离技术。这两项技术的出现使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术发生了革命性的变革。它们具有高灵敏度和高质量检测范围，使得在pmol的水平上准确地分析分子量高达几万到几十万的生物大分子成为可能，并得到迅速的发展。 电喷雾质谱技术 电喷雾质谱技术（Electrospray Ionizsation MassSpectrometry,ESI-MS）是在毛细管的出口处施加一高电压，所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴，随着溶剂蒸发，液滴表面的电荷强度逐渐增大，最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子，致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。电喷雾离子化的特点是产生高电荷离子而不是碎片离子，使质量电荷比（m/z）降低到多数质量分析仪器都可以检测的范围，因而大大扩展了分子量的分析范围，离子的真实分子质量也可以根据质荷比及电行数算出。 知识回顾Knowledge Review * ? 例如用MALDI/TOF测定生物大分子的分子量，多数情况下，只得到单电荷信息，有时也出现双电荷或者三电荷等多电荷信息，碎片离子较少。在ESI/FTMS条件下，测定多肽、蛋白质等生物分子，因为这些生物分子有多个可质子化的基团，在电离过程中，又处在电场作用下，所以容易形成多电荷离子。下面介绍在宽谱检测时，运用简单的联立方程求解的方法。 * * 从图中可以看出同时出现了8＋～23＋电荷态，并且表明P1＝1542,P2＝1696。用联立方程可算出肌红朊的分子量： 求解，得： 实际上计算机可直接得到表明电荷态与分子量的质谱图。 * 三、分子吸收光谱曲线 分子吸收光谱曲线 (1)物质吸收光有选择性。 (2)物质对光的吸收与物质结构有关(特征波长?max)。 ——定性分析的基础 (3)物质吸收光的程度与物质量有关(浓度大，峰越高) ——定量分析的基础 下 节 意义(说明)： ?max处最灵敏，准确度高。 Near UV CD spectrum 蛋白质中芳香氨基酸残基，如色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)及二硫键处于不对称微环境时，在近紫外区250～320 nm，表现出CD信号。 Phe残基: 255、261和268 nm附近；Tyr残基:277 nm左右；而在279、284和291 nm是Trp残基的信息；二硫键的变化信息反映在整个近紫外CD谱上。 近紫外CD谱可作为一种灵敏的光谱探针，反映Trp、Tyr和Phe及二硫键所处微环境的扰动，能用来研究蛋白质三级结构精细变化。 3.3.3 红外光谱 红外光谱是化合物较特征的性质之一。红外光是指波长由0.75 μm到200 μm的光，即从可见光以外到微波区的波长范围内的光。化合物的红外振动吸收通常用其所吸收的光的频率(以波数cm－1为单位)来表示。 当样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子吸收了某些频率的光，用作消耗于各键的伸缩或弯曲振动的能量。相应于这些吸收区域的透过光自然要减弱，因此，如按波数或波长记录透过红外光的强度，就得到表示吸收谱带的曲线，这就是红外光谱。红外光谱的范围通常是4 000～400 cm－1。这相当于吸收波长为2.5～25 μm的光。 如水分子有3种具有红外活性的振动，其振动频率分别为 3 756、3 657和1 595 cm－1) 水分子的三种具有