sm 城市水环境新型污染物的去除新技术.ppt

有无抑制剂存在时酶促反应的动力学方程 非专一性不可逆抑制剂 抑制剂作用于酶分子中的一类或几类基团，这些基团中包含了必需基团，因而引起酶失活。 专一性不可逆抑制剂 这类抑制剂选择性很强，它只能专一性地与酶活性中心的某些基团不可逆结合，引起酶的活性丧失。 1.辣根过氧化物酶 辣根过氧化物酶是酶处理废水领域中应 用最多的一种酶。有过氧化氢存在时，它能 催化氧化多种有毒的芳香族化合物，包括酚、 苯胺、联苯胺等，反应物是不溶于水的沉淀 物。 2.木质素过氧化物酶 木质素过氧化物酶也叫木质素酶，是白腐真菌细胞酶系统的一部分。它可以处理很多难降解的芳香族化合物和氧化多种多环芳烃、酚类物质。 3.漆酶 漆酶是由一些真菌产生，可通过聚合反应 去除有毒酚类。它具有非选择性，能同时减少 多种酚类的含量。漆酶的去毒功能与被处理的 特定物质、酶的来源及环境有关。 答案要点：（1）蛋白浓度=0.2×6.25mg/2mL=0.625mg/mL； （2）比活力=（1500/60×1ml/0.1mL）÷0.625mg/mL=400U/mg； （3）总蛋白=0.625mg/mL×1000mL=625mg； （4）总活力=625mg×400U/mg=2.5×105U。 常见的有机磷农药，如敌敌畏、敌百虫，它们杀灭昆虫的机理就在于可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，该酶的作用是将神经递质乙酰胆碱水解，若它被抑制，会导致乙酰胆碱的积累，使神经过度兴奋，引起昆虫的神经系统功能失调而中毒致死。 酶活力测定方法 终点法: 酶反应进行到一定时间后终止其反应，再用化学或物理方法测定产物或反应物量的变化。 动力学法:连续测定反应过程中产物\底物或辅酶的变化量，直接测定出酶反应的初速度。 底物浓度对酶反应速度的影响 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 （Michaelis—Menten曲线） 米氏方程的提出及推导 米氏常数的意义 米氏常数的测定 化学反应动力学基础 反应分子数 1.单分子反应 仅有1种反应分子参加的反应， A P，如同分异构 v=kc c 反应物的浓度 2 .双分子反应 有2种反应分子参加的反应 A+B P+Q V=kc1c2 1.一级反应 单分子反应 符合v=kc的反应 蔗糖+水 葡萄糖+果糖 v=kc蔗糖c水 由于水大于蔗糖，因此水的影响忽略则v=kc蔗糖 2.二级反应双分子反应符合v=kc1c2的反应 3.零级反应反应速率与反应物无关的反应,即反应速率为一常数。 反应级数 E +S → ES → P + E E：酶 S：底物 ES：中间产物 P：最终产物 中间产物学说 许多实验事实证明了E－S复合物的存在。 E－S复合物形成的速率与酶和底物的性质有关。 1902年Henri通过水解蔗糖实验提出该学说 在酶浓度，pH，温度等条件不变的情况下研究底物浓度和反应速度的关系。 Michaelis Menten 根据中间产物学说推导出米氏方程。 酶促反应动力学 1913年，德国化学家Michaelis和Menten根据中间产物学说对酶促反应的动力学进行研究，推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式，称为米氏方程。 酶促反应动力学 Km -米氏常数 Vmax-最大反应速度 （1）推导的v为反应初速度； （2）反应体系处于稳态，即ES的生成量 与反应量相同； （3）[S] [E]。 推导米氏方程三个假设： 根据中间产物学说，酶促反应分两步进行 米氏方程的推导 初始反应时产物的生成量很少 → K4 的反应忽略不计 [E]?酶总量； [Et]?反应后t时的酶总量； [ES]?中间产物浓度； [Et] ? [E]+[ES] 酶促反应开始时，若形成的速度为v,则 [ES]生成速度： v1=k1 [E][S]=k1[(Et)-(ES)][S] [ES]分解速度： v2=k2 [ES]+k3[ES]=(k2+k3)[ES] 假设：反应体系处于稳态，即ES的生成速度与反应速度相同 v1 =v2 K1[(Et)-(ES)][S] = [ES](k2+ k3) [(Et)-(ES)][S]/[ES]=(k2+k3)/k1 令 Km=(k2+k3)/k1 则 Km [ES]+[ES][S]=[Et][S] 整理得 [ES] =[Et] [S]/(Km ? [S])