药品无菌检查方法的验证试验教案.pptVIP

无菌检查法方法的验证试验; 同其他分析方法一样，无菌检查也必须通过证明所采用的检验方法和检验条件是可靠的，来保证该检查方法的完整性和试验结果的准确性。;一．2005年版药典的修订与完善; 2005年版无菌检查法主要方面与、的比较 比较项目 2005 29 2002 检验条件规定 总体10000级、局部100级 无具体规定 无具体规定 人员要求 无具体规定 正确培训和认可 细菌检查培养基 硫乙醇酸盐流体培养基 硫乙醇酸盐流体培养基 硫乙醇酸盐流体培 养基 真菌检查培养基 改良马丁培养基 大豆－胰酪胨培养基 大豆－胰酪胨培养基 培养基灵敏度检查 与方法验证用菌株 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌；生孢梭菌；白色念珠菌、 黑曲霉 检验方法 只要供试品性状允许， 性状允许的样品均可采用薄膜过滤， 应采用薄膜过滤法 利于抗菌影响去除 稀释剂与 薄膜过滤冲洗液 0.1％蛋白胨水溶液； A、D、K 0.1％蛋白胨水溶液（ 0.1％ 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 （聚乙氧基乙醇、0.1％吐 温-80）；十四烷酸异丙酯 培养条件与时间 14天（+2；3天） 不少于14天（+不少于4天） 14天（＋7天） 结果判断与复试规定 一次结果为准 (设备及环境不符合要求、实验过程有可能引起污染的因素、阴性对照有菌生长、分离微生物可明确归因于无菌实验过程中所用的材料或技术错误造成的。单倍量重试) ;二．方法验证试验建立及要求;主要内容;怎么做;三 消除抑菌性的方法 1. 中和法——利用化学（生物）专属性灭活 如:对氨基苯甲酸 2. 稀释法——降低供试品的相对浓度 3. 薄膜法——利用体积差异分离 各方法组合运用，效果更佳！;主要解决措施：;四 计细菌数： 菌液的制备和菌液的计数。 五 确定取样量：见表2-1和表2-2;三．方法验证试验的操作;1.薄膜过滤法;2．直接接种法;;四．方法验证试验最少取样量 表2-1 液体制剂验证试验的最少取样量;表2-2 固体制剂验证试验的最少样品量;五．方法验证试验的实例（示教内容）;2、方法与结果;　2.3 供试液的制备 　　　取供试品3支（3支×0.5支=1.5g），分别加入0.1%蛋白胨水溶液约10使溶解，摇匀，供一株试验菌用。 　 　2.4 薄膜过滤法 重复菌液的计数的步骤 阳性菌的选择;3、结论;(二) 液体制剂;2、方法与结果;3、结论;六、注意事项;无菌检查的供试品