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DNA微阵列(或芯片)技术原理及应用; DNA微阵列或芯片(DNA microarray or chip)技术是近年发展起来的又一新的分子生物学研究工具.它是利用光导化学合成、照相平板印刷以及固相表面化学合成等技术,在固相表面合成成千上万个寡核苷酸探针，或将液相合成的探针由微阵列器或机器人点样于尼龙膜或硅片上，再与放射性同位素或荧光物标记的DNA或cDNA杂交,用于分析DNA突变及多态性、DNA测序、监测同一组织细胞在不同状态下或同一状态下多种组织细胞基因表达水平的差异、发现新的致病基因或疾病相关基因等多个研究领域. ;1 概念理论;2 DNA微阵列或芯片的制作和原理 2.1 固相表面高密度寡核苷酸探针的合成及排列; 而每次所添加的脱氧核酸是由“面具”上的顺序所决定的,而后者又是由计算机根据设计者需要所控制的,因此一个限定长度的寡核苷酸则排列在预定位置上.对于N个碱基的探针，需4N个化学合成循环步骤可达到4n个探针数，如探针长度为4个碱基，化学合成循环步骤为16次,探针数为256个；如探针长度为8个碱基，则合成循环需32步即可达到65 536个探针.这些探针在不同的照相平板印刷分辨率作用下,可在单位面积上合成不同的位点数.如分辨率为200 μm，合成密度为2 500个位点/cm2 ，如分辨率为20 μm，合成密度为250 000个位点/cm2等，由此构成高密度寡核苷酸微阵列;2.2 液相探针的合成及在固相表面的 排列 ;2.3 探针的杂交和检测 ;2.3 探针的杂交和检测;3 应用 3.1 基因表达水平的检测 ;3.2 寻找可能致病基因或疾病相关基因;3.3 基因点突变及多态性检测;3.4 DNA序列测定;4 展望;Thats over !
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