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富集培养:增殖培养,是指在培养基中加入欲分离菌所需的某些营养物和抑制其他微生物生长的抗菌物质,创造利于分离菌而不利于其他菌生长繁殖的条件,从而使分离菌快速增殖的培养方法。
连续培养:是在微生物的整个培养期间,通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。;优点:
高效;
自控;
产品质量较稳定;
节约且使负荷均衡合理。
缺点:
菌种易退化;
易污染杂菌;
营养物的利用率一般低于单批培养。
连续发酵生产时间受以上因素限制,一般只能维持数月~ 1年。;
复壮:是指采用适合原种生长的良好培养条件使发生衰退的菌种恢复原来性状的一种培养方法。;抑制、死亡、消毒、灭菌、防腐、化疗
抑制(inhibition):是在亚致死剂量因子作用下导致微生物生长停止,但在移去这种因子后生长仍可以恢复的生物学现象。
死亡(death):是在致死剂量因子或在亚致死剂量因子长时间作用下,导致微生物生长能力不可逆丧失,即使这种因子移去后生长仍不能恢复的生物学现象。
;消毒(Disinfection):是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌,而对被消毒的对象基本无害的措施。;灭菌(sterilization):是指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施。
杀菌和溶菌
;
防腐(antisepsis):是在某些化学物质或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生长的一种措施。
化疗(chemotherapy):是指利用具有高度选择毒力的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖,借以达到治疗该宿主传染病的一种措施。;比较项目; 温度
辐射
干燥
渗透压
微波与超声波
过滤除菌
;温度;★超过最低生长温度时,微生物不生长,温度过低,甚至会死亡。
★超过最高生长温度时,微生物不生长,温度过高,甚至会死亡。
★处于最适生长温度时,生长速度最快,代时最短。;温度;低温控制微生物的方法;菌种保藏
液氮的温度(-196℃)、干冰温度(-70℃)、
-20℃和4℃。
食品冷藏
冷藏(0~4℃)与冻藏(-18℃)
;常用的高温消毒灭菌法;干热灭菌法;★焚烧法(incineration):是将被灭菌物品在火焰中燃烧,使所有的生物质碳化。
★特点:简单、彻底,但对被灭菌物品的破坏极大。
★适用于无经济价值的物品灭菌,及不怕烧的实验器具,如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。;湿热灭菌法;在同等条件下,湿热的杀菌效力比干热大。
★原因:
1) 菌体内含水量越高则蛋白质凝固温度越低;
2)蒸汽具有潜热,当蒸汽与被灭菌的物品接触时,可凝结成水而放出潜热,使温度迅速升高,加强灭菌效果。
3) 饱和水蒸汽穿透力强;
4) 湿热易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性,主要破坏氢键结构。;常压法;
煮沸消毒法:即将消毒物品如注射器、金属用具、解剖用具等在水中煮沸15min或更长时间,以杀死细菌或其他微生物的营养体和少部分的芽孢或孢子。
间歇灭菌法:又称分段灭菌法或丁达尔灭菌法。即流通蒸气(或蒸煮)反复灭菌几次。适用于不耐高温的物品灭菌,缺点是麻烦、费时。;加压法;★方法:
121℃(1kg/cm2或15磅/英寸2)维持15-20min。
112℃(0.5kg/cm2或8磅/英寸2)20-30min。
115℃(0.75kg/cm2或11磅/英寸2)20-30min。;高 压 蒸 汽 灭 菌 锅;
连续加压蒸气灭菌法:也称“连消法”。让培养基在管道的流动过程中快速升温、维持和冷却,然后流进发酵罐。
仅用于大型发酵厂大批量培养基的灭菌。
培养基一般加热至135~140℃下维持5~15s。;影响加压蒸汽灭菌效果的因素;辐射;干燥;等渗溶液对微生物生长有利。
细胞处于低渗溶液中会吸水膨胀乃至破裂。
细胞处于高渗溶液中会脱水引起质壁分离,导致死亡。
主要用于保存肉类、水产品、蔬菜、水果等,常用10%~15%食盐或50%~70%的糖来腌渍食品,使微生物不能生长,防止食品腐败。;根据微生物对高渗透压耐性的不同,将其分为以下三类:
高度嗜盐细菌(20-30%食盐溶液中生长)
嗜盐细菌 中等嗜盐细菌(5-18%的食盐溶液中生长)
低等嗜盐细菌(2-5%的食盐溶液中生长)
耐盐细菌(可在10%以下的食盐溶液中生长)
耐糖细菌(可在60%以下的含糖高渗溶液中生长)
普通微生物一般在0.85~0.9
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