人胚胎干细胞H1说明书.pdfVIP

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2020-01-31 发布于天津
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人胚胎干细胞H1说明书.pdf

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中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库细胞说明书 H1 人胚胎干细胞说明书目录号：SCSP-301 细胞名称：H1 细胞描述：人胚胎干细胞，曾用名WA01 物种：人，男性组织：内细胞团细胞来源：2006年引进生物安全等级：BSL-1  完全培养液配方：hES完全培养液（目录号：SCSP 613）。配方见下冻存日期/冻存代数：详见冻存管/培养瓶标识参考传代周期：7 天    参考传代比例：12 14 参考换液频率：每天 2×冻存液：hES完全培养基20%，FBS60%，DMSO20%。或使用 hES专用冻存液（目录号：SCSP-668）进行冻存细胞形态：克隆状生长，需使用CF-1MEF （SCSP-105R）作为饲养层细胞支原体检测结果：阴性 H1 细胞照片：参考文献： Embryonic Stem CellLinesDerived from Human Blastocysts,JamesA.Thomson,et al. Science282, 1145(1998) 1 5 第页，共页中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库细胞说明书备注： 1. hES完全培养液配方（600ml）： DMEM/F12 (Invitrogen, 11330) 466ml Knockout Serum Replacement (Invitrogen, 10828) 120ml Non-essentialAminoAcids, 100× (Invitrogen, 11140) 6ml Glutamax (Invitrogen,35050) 6ml 55mM2-mercaptoethanol (Invitrogen,21985) 1.5ml bFGF (Invitrogen, 13256) 2.4 g 2. 相关产品：H1所使用的饲养层细胞：CF-1MEF 本细胞库可提供： SCSP-105 P0,可以增殖 SCSP-105R 已经经过射线处理，不再增殖，可直接作为feeder 使用。 3. 我库冻存时，体积为500 μl，预期存活率70%，每支冻存管的细胞复苏，3至 4 天后，会形成30 至40个克隆，建议复苏至1个T25培养瓶中。中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库 2 5 第页，共页中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/干细胞库细胞说明书 hES Protocol 人胚胎干细胞（）（有饲养层）培养 MEF细胞铺制： 1. T25 3mlMatrigel 37 在培养瓶中加入工作液，摇匀覆盖培养瓶底面，于 ℃细胞培养箱中放置 1小时以上。 2. Matrigel 37 MEF T25 吸除，加入事先水浴温热至 ℃的完全培养液。一般