8棒状杆菌属课稿.pptxVIP

棒状杆菌属 Corynebacterium革兰阳性，一端或两端膨大呈棒状，无荚膜、无鞭毛，不产生芽胞多为条件致病菌致病菌：白喉棒状杆菌形态G+，菌体细长微弯，一端或两端膨大、有异染颗粒，常排列呈V、L形Albert染色Neisser染色培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求较高BAP：有狭窄溶血环亚蹄酸钾血琼脂平板：分3型，黑色菌落吕氏血清斜面：灰白色、不透明、有光泽的S型菌落，异染颗粒明显。吕氏血清斜面100g/L葡萄糖肉汤（灭菌，pH7.4）1份小牛血清（或兔、羊、马血清）3份? 用无菌操作法将上述成份混合于灭菌三角烧瓶。无菌分装于15mm×150mm灭菌试管，每管3~5ml ，将试管斜置于血清凝固器内，间歇灭菌3天，。第1天徐徐加热85℃，维持30min，使血清凝固，置3℃温箱过夜；第2天和第3天再用85~90℃灭菌30min，取出后置4℃备用。 用于白喉棒状杆菌培养，观察异染颗粒。生化反应氧化酶＋葡萄糖＋、麦芽糖＋硝酸盐还原＋分型亚蹄酸钾血琼脂平板划分菌落形态为重型、中间型和轻型，据K抗原划分血清型：重型：13个血清型中间型：4个血清型轻型：40个血清型抵抗力对湿热抵抗力弱抗寒冷和干燥对青霉素、氯霉素、红霉素敏感致病物质白喉外毒素：β棒状杆菌噬菌体带有编码外毒素的tox基因, 在溶原阶段基因整合到染色体上即可产生A亚单位和B亚单位B亚单位有结合和转位功能A亚单位上有1个催化区作用靶：心肌和神经细胞作用机制A亚单位可使细胞延伸因子-2（EF-2）灭活，影响蛋白质的合成。作用特点毒性作用大，1分子能杀一个细胞多种细胞，特别心肌、神经细胞均有毒素受体肿瘤细胞对此毒素特别敏感，用于靶向治疗所致疾病：白喉--急性呼吸道传染病传染源：患者及带菌者传播途径：飞沫或污染临床表现细菌--------上呼吸道粘膜， 生长繁殖，产生毒素, 细菌与毒素共同作用引起局部症状：炎症，坏死，纤维蛋白渗出假膜——窒息毒素入血引起全身中毒症状外周神经炎：膈肌麻痹--呼吸困难 声带麻痹--声音嘶哑 软颌麻痹--吞咽困难心肌---心肌炎感染后机体可获得牢固的免疫力白喉杆菌的检测程序标本直接涂片染色镜检（革兰染色、异染颗粒染色）吕氏血清斜面，35℃培养12~18h亚碲酸钾血琼脂平板35℃培养24~48h血琼脂平板35 ℃培养12~18h观察菌落特点涂片染色镜检（革兰染色、异染颗粒染色）吕氏血清斜面涂片染色镜检生化反应毒力试验微生物学检查法标本：咽拭子直接涂片镜检—形态，异染颗粒，分离培养—BAP、吕氏血清斜面，亚碲酸钾平板毒力鉴定—动物试验，Elek平板毒力实验Elek平板试验37℃培养24~48h20%血清肉汤琼脂白喉杆菌菌苔沉淀线(阳性)含100U/ml白喉抗毒素滤纸片Elek Test锡克试验(Schick test)：测定对白喉的免疫力皮肤试验原理：毒素抗毒素中和反应方法：注射毒素（毒性、蛋白质） 试验 加热破坏的毒素（无毒、蛋白质） 对照 结果：48小时观察结果， 有红肿 阳性反应 无免疫力 无红肿 阴性反应 有免疫力应用：检查机体对白喉的免疫力 预防接种前的筛选与接种后效果观察 流行病学调查Schick test结果分析 试验侧 对照侧 本质 阴性反应 – – 有免疫力阳性反应 24~48h –无免疫力 4~7d达峰假阳性反应 6~18h红肿同前有免疫力，超敏反应 1~2d消退 混合反应 6~18h红肿6~18h红肿 无免疫力，超敏反应 4~7d达峰3~4d反应消退防治原则-与破伤风类似预防人工主动免疫：注射白喉类毒素（白百破三联疫苗）人工被动免疫：注射白喉抗毒素药物预防：如注射青霉素或口服红霉素治疗白喉抗毒素---皮肤试验、早期使用抗生素第二节 其他棒状杆菌大多不产生外毒素很少有异染颗粒大多正常寄生于人体，为条件致病菌本章要点概念：异染颗粒、 Elek毒力平板试验、锡克试验(Schick test)白喉棒状杆菌的所致疾病与致病机理、微生物学诊断方法与判断依据思考题Elek毒力平板试验为哪几种实验方法的叠加？类似的实验设计还有哪些？这些实验方案的巧妙之处在那里？