气相色谱基础理论1.pptVIP

一、什么是色谱法？ 茨维特(Tswett)的实验 茨维特：俄国植物学家，主要从事植物色素的研究工作，在1906 年 发表的文章中，首次提出色谱的概念。 茨维特的实验 什么是色谱法？ Chromatography 色谱法是一种分离方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，两相作相向运动。 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 因此色谱分析是一种分离、分析法。 二、色谱法分离原理 当流动相中所携带的混合物流过固定相时，就会和固定相发生作用(力的作用)。由于混合物中各组分在性质和结构上有差异，与固定相发生作用的大小也有差异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 气相色谱分离原理 三、什么是气相色谱法？ 色谱法的分类： 按流动相状态的不同，可分为以下三类： 气相色谱法 (GC) 液相色谱法 (LC) 超临界流体色谱 (SFC) ? 气相色谱仪流程 一、色谱相关术语 关于色谱峰 关于保留值 关于分配平衡 关于色谱峰的术语 几个概念——分离度R 分离度R R越大，说明两组分分离得越好。 由于该定义综合了色谱动力学和热力学因素，可作为色谱柱的总分离效能指标。 色谱条件的选择 流速 柱温 气化温度 检测器温度 进样量 载气种类 固定相种类 流速u（Fc） 根据速率方程，可计算求出最佳流速，此时柱效最高。在实际工作中，为缩短分析时间，往往使流速稍高于最佳流速。 具体的：对于填充柱，氮气的实用最佳线速为10-12cm/s；氢气为15-20cm/s；氦气介于两者之间。若填充柱内径为3mm，则体积流速为氮气40-60ml/min，氢气60-90ml/min。 柱温Tc 直接影响分析效能和分析速度。 每一种固定液都有它的最高使用温度，柱温不可超过这一温度，否则固定液挥发流失。 柱温太高，不利于分离。但柱温太低，被测组分的扩散速度下降，分配不能快速达到平衡，影响峰型，柱效下降，并使分析时间大大延长。 柱温选择的原则是，在保证难分离物质有良好分离的前提下（分离度满足要求），尽可能采取较高柱温，以缩短分析时间，保证峰型对称。 汽化温度 一般进样方法下，汽化温度比柱温高30-70℃。 进样量大时高一些好，保证瞬间汽化。 保证不可超过试样的分解温度。 其它气化温度与具体进样方式有关。 检测器温度 一般大于或等于柱温，具体与检测器种类有关。 进样量 液体试样一般进样量0.1-5μl。 气体试样一般进样量为0.1-10ml。 具体视柱类型，固定液含量（不能超过柱容量） 、进样方式、检测器的灵敏度和线性范围等确定。 流动相（载气）种类 流动相的种类要视检测器种类确定。 常用的有氢气（热导用）、氮气（氢火焰用）、氦气（均可用，但价格较高）。 氢气和氦气适合于快速分析。 氮气做载气峰型较好，柱效较高。 选择合适的色谱柱 选择合适的色谱柱 实验四 程序升温毛细管色谱法分析白酒中微量成分的含量 一、目的要求 1 ．了解毛细管色谱法在复杂样品分析中 的应用。 2 ．了解程序升温色谱法的操作特点。 3 ．熟悉内标法定量。 二、基本原理 程序升温是指色谱柱的温度，按照适宜的程序连续地随时间呈线性或非线性升高。在程序升温中，采用较低的初始温度，使低沸点组分得到良好分离，然后随着温度不断升高，沸点较高的组分就逐一流出。通过程序升温可使高沸点组分能较快地流出，因而峰形尖锐，与低沸点组分类似。 白酒中微量芳香成分十分复杂，可分为醇、醛、酮、酯、酸等多类物质，共百余种。极性和沸点变化范围很大，传统的填充色谱法不可能做到一次同时分析它们。色谱技术并结合程序升温操作，利用PEG一20M 固定液的交联石英毛细管往，以内标法定量，就能直接进样分析白酒中的醇、酯、醛、有机酸等几十种物质。 三、仪器与试剂 1 ．仪器带程序升温的气相色谱仪，配置氢焰检测器，化学工作站，色谱柱RXT--wax 30m X 0 . 25 mm X 0 . 25 mm 或其他中强极性毛细管柱；氢火焰离子化检测器；自动进样器 2 ．试剂乙醛、乙酸乙酯、甲醇、正丁醇、乙酸正戊酯（内标）和乙醇（均为分析纯）。 四、实验步骤 1 ．按气相色谱仪操作方法使仪器正常运行，并调节至如下条件： 进样口温度： 250 ℃ 。 检测器温度： 250 ℃ ；补充气流量 20 mL/ min； 氢气和空气的流量分别为 30 mL/min和 300 mL/ min 。 柱流速： 1.5mL/min，恒流；分流比 20 。 柱温：起始温度 35 ℃ ，保持 3 min ；然后以 5 ℃/min升温至 75 ℃ ，保持 3 m