癌的标记物的临床应用.docxVIP

肿瘤标志物临床应用的指导原则 简 介 肿瘤标志物的定义：肿瘤标志物是可以在血清、血浆、其他体液、组织提取物或石蜡固定的组织中检测到的自然生长的分子 ，用于确定肿瘤存在、评价病人预后以及对病人的治疗效果进行监测。肿瘤标志物存在于细胞浆和细胞核中，与细胞表面膜相连，在血液中进行循环。大多数肿瘤标志物可以用免疫学的技术进行检测。 1998 年 5 月， NACB（美国临床生物化学学会）召开研讨会，起草了肿瘤标志物的分析检测以及临床应用 的指导原则。 1997 年 EGTM（欧洲肿瘤标志物组织）正式成立，进行临床相关的肿瘤标志物及其检测质量控 制和标准化管理。 质量要求和质量控制 肿瘤标志物检测前的要求 对病人的信息进行充分了解，确保实验结果的准确性。 肿瘤标志物分析检测的要求 满意的测试结果来 自于符合要求的标本以及经过室内质控（ IQC ）和实验室间质量评价（ EQA）监测评价的有效的实验方法。室 内质控和室间质控的监测评价包括实验的重复性、采用的标准、所用基质的影响、动力学范围、参考品、稳 定性、分析结果的理论数据、实验方法（具体内容见表 1 ）。 自动化的免疫分析仪器所得实验结果的分析内和 分析间变异系数分别 5%和 10%，这是手工分析难以达到的。 各实验室还应注意影响实验特异性的因素。表 2 总结了三个最重要的可能引起肿瘤标志物检测结果错误的原因。 肿瘤标志物分析检测后的要求 表3 列出了 EGTM对肿瘤标志物分析检测后的要求。用 EQC 进行实验室间检测结果的评价和比较非常重要。 表1：与肿瘤标志物检测质量控制相关的实验因素 室内质量控制（ IQC ）的要求 重复性 建立测定认可的标准 样品与病人血清 理想的分析批内误差应 5%；批间误差 10%。 选择合适 尽可能相似 IQC 样品的浓度适合临床应用 评 的 IQC 标准。 仅仅采用试剂盒所附的质控品是不够的， 价实验的干扰因素 还应包括独立来源的可靠的血清基质质控品。 应包括肿 瘤标志物的阴性和低值阳性质控品。 需要较宽的浓度范 围，评价高浓度样本稀释后的测定准确度 要求对实验的 干扰因素（嗜异性和其他抗体、血凝试管中的凝血试剂 等）进行检查 实验室间质量评价（ EQA）的要求 适宜浓度的 EQA 样本 实验 “稳定性 ”的评价 验 EQA 样本应具有适宜的工作浓度范围，但有时会需要较 证靶值的精确度和稳定性 实验说明 高浓度的 EQA 样本来评价实验的稀释步骤。对于某些分 析（如： AFP 、hCG）用无分析物血清检查基线的可靠性 是很重要的。 在一定时间内（ 6-12 个月）重复进行相 同样本的测试， 对实验室内实验结果的重复性进行评价。 指无现成参考方法时，需要对所使用的方法进行以下验 证：  1 ． 稳定性：对同一样本进行重复测定。  2 ． 用 已知浓度的相关国际标准品进行回收率实验。 3 ．对不 同实验室间的检测结果进行比较。 对实验室间的实验比 较（参考值范围、结果累计报告等）很有价值。 表2. 引起肿瘤标志检测错误结果的潜在因素 高浓度 hook 效应 通常情况下，肿瘤标志物的浓度范围会有好几个数 量级的差别，因此有可能需要确认高浓度的样本产 生的 hook 效应，以避免低值结果的错误报告。这 对于首次进行肿瘤标志物检测的病人犹为重要。 （可 以通过使用高结合力的固相抗体、分析两个稀释度 的样本、或通过后续的分析步骤包括清洗步骤来减 样本间的携带 少 hook 效应。） 检测高浓度的样本会产生样本间携带的潜在问题， 因此有必要对此进行随时检查。 嗜异性或人抗鼠抗体（ HAMA）的干扰 IgG 抗体可以和测定中使用的抗体进行反应。通常 情况下，由于进行影像检查和治疗而使病人接触鼠 单克隆抗体，由此而产生的人抗鼠抗体会使肿瘤标 志物的检测出现错误结果。 （可以通过使用阻断剂对 样本进行前处理、在反应基质中加入非免疫的鼠血 清或对样本进行稀释后再进行分析的方法来减少 HAMA的干扰。） 表3. 肿瘤标志物检测分析后的重点要求 通过询问医生获取病人的临床信息 有必要鼓励临床医生提供带有说明的简短的临床信 息（如手术后、化疗后等） ，这有助于确认偶然误差 （如可能出现的仪器上加错标本等） 。 参考值范围的有效性 通常来自相应的健康人群的参考值范围与初始治疗 前的肿瘤病人有很好的相关性。因此，病人自己的 “基线 ”值对于肿瘤标志物的测定结果具有非常重要 的参考意义。只有基于有效的参考范围，增高甚至 在参考范围增高才有临床显著性意义。 应包括生物学变异和分析数据的变异。确定的 ±25% 了解显著变化或临床相关变化的组成因素 的升高或降低认为具有临床意义，但须进行进一步 改变方法时应进行方案确认 的工作。 有助于确认由于改变方法而引