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（二）无菌技术 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。 避免操作者自身被感染。 无菌技术 （1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒； （2）将用于培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌； （3）实验操作应在酒精灯火焰附近进行； （4）避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 消毒与灭菌 消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子） 最常用的消毒方法： 1、煮沸消毒法： 100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒法 干热灭菌法 (1)焚烧：是一种彻底的灭菌方法，但仅适用于废弃物品或尸体等。 (2) 灼烧：直接用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的接种环、试管口等的灭菌（图）。 (3)干烤：用烤箱灭菌。一般加热至160℃～170℃经2小时。适用于高温下不变质、不蒸发的物品， 如玻璃器皿、瓷器等。 高压蒸汽灭菌法：是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。方法是在一密闭蒸锅—高压蒸汽灭菌器内进行的。加热时蒸汽不能外溢，容