实验2：分离以尿素为氮源的微生物知识.pptVIP

* 本实验是训练学生进行微生物实验操作的经典实验，且这一技术常常会用于后续实验中。 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 思考： 采用什么方法从土壤中分离出以尿素为氮源的微生物？ 如何判断分离出的细菌确实能将尿素分解？ 一.实验原理 尿素 NH3 中性 碱性 酚红颜色： (酸性)黄色 红色 (变色范围 pH6.4-8.2) 二.实验目的 使用以尿素为唯一氮源的培养基分离细菌(有脲酶) 通过指示剂（酚红）颜色的变化检知培养基pH的变化(脲酶催化的化学反应) 以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基中尿素的分解，产生的NH3使培养基的pH由原来的中性变为碱性，于是培养基中的酚红变成红色，菌落的周围会产生红色环带，红色环带愈大，表明这种菌利用尿素的能力愈强。 三.实验步骤 ２.倒平板 ３.制备一定浓度梯度的细菌悬液 １g土壤＋９９ml无菌水，振荡，为１０-2稀释液，依次制备 １０-3、１０-4、１０-5的土壤稀释液。 ４.稀释涂布分离法分离细菌 １.制备无菌的全营养ＬＢ固体