复习_DNA重组技术的基本工具.pptVIP

专题知识框架 基因工程 1.1 基因工程的基本工具 1.2 基因工程的基本操作程序 1.3 基因工程的应用 1.4 蛋白质工程的崛起 基因工程概念 基本工具 操作程序 受体 目的基因 基因有关的工具（各种酶）比较 基因载体 基因剪刀 基本针线 应用及意义 导入受体细胞 蛋白质工程 获取目的基因 基因表达载体的构建 一、什么是基因工程？ 1.供体：提供__________ 2.操作环境：______ 3.操作水平：__________ 4.原理：__________ 5.受体：表达目的基因 6.本质：性状在______体内表达 7.优点：克服_______________障碍，定向改造生物_____ 目的基因 体处 分子水平 基因重组 受体 远缘杂交不亲和 性状 二、需要哪些基本工具？ 1.限制性核酸内切酶（简称：限制酶） （1）来源：主要从______生物中分离纯化出来。 （2）作用：识别特定的___________并切开相应两个核苷酸之 间的_____________。 （3）结果：产生__________或平末端。 原核 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 2.载体 （1）种类：_____、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 能__________ 有一个至多个________________ 有特殊的__________ 【点拨】提取目的基因和切割载体使用同一种限制酶，目的是 能形成相同的黏性末端，形成重组DNA分子。 质粒 自我复制 限制酶切割位点 标记基因 （2）质粒特点 2.作为载体的条件 便于重组DNA的鉴定和选择 具有特殊的标记基因 可携带多个或多种外源基因 有一个至多个限制酶切割位点 目的基因稳定存在且数量可扩大 稳定并能复制 适应性 条件 3.DNA连接酶 （1）种类：按来源可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。 （2）作用：在两个核苷酸之间形成____________以连接_____ _________。 磷酸二酯键 两段 DNA片段 基因工程的工具 1.与DNA相关的酶 （1）五种DNA相关酶的比较： 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA (水解)酶 DNA解旋酶 形成产物 作用部位 作用底物 DNA分子 磷酸二酯键 黏性末端或平末端 DNA片段 磷酸二酯键 重组DNA分子 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 子代DNA DNA分子 DNA分子 碱基对间的氢键 磷酸二酯键 形成脱氧核苷 酸单链 游离的脱氧核苷酸 （2）限制酶和DNA连接酶之间的关系图示： 【高考警示钟】 1.切割质粒需使用限制酶1次，切割目的基因则需要使用相同的限制酶2次。因为质粒是环状DNA，而目的基因在DNA分子链上。 2.质粒DNA分子上限制酶切割位点的选择必须保证至少有一个标记基因是完整的，如果标记基因全部被切开则不便于鉴定与选择。 3.基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同，基因工程中的载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内，膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。 【典例训练1】我国科学家成功克隆了控制水稻理想株型的关键多效基因IPA1。研究发现，基因IPA1发生突变后，会使水稻穗粒数和千粒重（以克表示的一千粒种子的重量）增加，同时茎秆变得粗壮，增加了抗倒伏能力。实验显示，将突变后的IPA1基因导入常规水稻品种，可以使其产量增加10％以上。下图表示该水稻新品种的简易培育流程，据图回答：