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临床微生物检验标本的采集微生物让人类步步为营 我们应该追求: “准确的病原学诊断” “针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提!基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查(早期采集)2.在抗菌药物使用前采集标本(早期采集)3.采样时严格执行无菌操作(无菌采集) 4.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂(无菌采集) 5.送检标本应注明来源和检验目的6.采样后立即送检7.做好防护(生物安全)如何提高细菌阳性检出率?标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本(退检制度)高质量、多种分离培养基培养环境二、标本的处理一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送,有时可直接用抽取标本的注射器运送。 其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能及时送检,标本应置于一定环境中保存,如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中,脑脊液等则要在25℃保存。患者标本中可能含有大量致病菌,不管标本运送距离远近,都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁,容器必须包装好,防止送检过程中倒翻或碰破流出。最有价值的细菌学检测项目 血液培养 脑脊液培养 脓液培养 痰液培养 粪便培养 尿液培养生殖道标本培养厌氧标本培养其他无菌体液培养血培养标本采集与运送血培养是进行血流感诊断的最佳手段采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测.检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.如有细菌,则极有可能为致病的细菌.进一步进行鉴定/药敏试验.血培养概念:完整的血培养过程医师开出送检单护理人员收集送检样本实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物三级报告:为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果目前血培养的问题:采血时机不合适采血套数不够采血量不足只做需氧培养,不同时做厌氧培养采血前或采血时正在使用抗生素治疗血流感染与血培养的规范实践————关于血培养指征“只有在发热时,才需要进行血培养。”?想采就采血培养的指征当怀疑血流感染或脓毒症时,应常规行血培养怀疑患者有血流感染的症状有:不明原因的发烧(>38℃)或体温过低(<36℃)白细胞增多( >10,000/ul),粒细胞减少( <1,000ul)休克,寒颤,僵直严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾炎,腹部术后感染,…)心率异常加快低血压或高血压呼吸频率加快———关于采血时机“何时采血进行血培养,无特殊时间要求。”?采集血培养样本的最佳时间尽可能在患者寒战或开始发热时采血在患者接受抗生素治疗前采血如患者已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之前采血培养 采血部位 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时,以肘动脉或股动脉采血为宜。对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者,在病灶或者髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培养。常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置中采集,检出污染或定植菌的可能性较大———关于采血套数及部位 “为减轻患者痛苦,只从一个穿刺部位采一份血液标本即可。”?基本概念成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个,也叫“一份”注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套应从另一个穿刺点获得。儿童一般只做需氧培养,但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。 采血套数Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548表皮葡萄球菌的临床意义致病菌污染菌? 采集1套无法判断是病原菌还是污染菌。2-3套血培养,有助于污染的判断。Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333关于血培养套数与采血部位每位患者每次采血最少2套,3套更好初发患者,绝不能只采1套标本 多个穿刺部位采血。因多部位同时发 生污染的几率较小,便于对结果进判断 ——— 关于采血间隔“两套血培养采集间隔无特殊要求。”?关于标本采集间隔时间只要怀疑血液细菌感染,应即刻采集。采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行,在1h内采集2~3次做血培养。 对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h 采集血液,或于寒战或发烧后1h进行。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3d,每天采2 份。可疑细菌性心内膜炎,在1到2小时内采集3份血标本,如果24小时后阴性,再采集3份以上标本 ——— 关于采血量“每瓶采集多少血液无特殊要求。”?采血量(ml)与检出率的关系 Overall血培养物每增加一毫升,真性菌血症成年人微生物的检出率增
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