细胞生物学研究方法2010.pptxVIP

;3. 分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。 R=0.61λ/N．A． 其中λ为入射光线波长；N．A．为镜口率 ＝ｎsinα/2，n=介质折射率；α=镜口角（样品对物镜镜口的张角） 。 思考：如何提高显微镜的分辨能力？;1. 构成： ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。;（二）荧光显微镜 Fluorescence microscope;;把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。 1.环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间。 2. 相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。;倒置显微镜 inverse microscope ;Fluorescence image of epithelial cell, DNA in blue and Microtubules in green;荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色）;;（三）激光共聚焦扫描显微境 Laser confocal scanning microscope, LCSM;激光共聚焦扫描显微镜;;;二、电子显微镜;透射电子显微镜;20世纪60年代问世，用来观察标本表面结构。 分辨力为6~10nm，由于人眼的分辨力（区别荧光屏上距离最近两个光点的能力）为0.2mm，扫描电镜的有效放大倍率为0.2mm/10nm=20000X。;人类红细胞;酵母;人类精子;;;Low speed;;;;;原代培养(primary culture) ;原代培养 （primary culture）：即：直接来自动物机体的首次培养。 传代培养（Passage）：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶称为传代或传代培养。 。;;细胞融合 ;单克隆抗体技术 ;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;基因克隆(gene cloning) ;动物细胞核移植克隆技术 ;转基因敲除小鼠的获得 ;基因敲进(knockin)