蛋白质的生物合成张敏.pptxVIP

第四章：翻译及其调控;;第一节：蛋白质合成的生物体系;（一）原核生物mRNA的特点; 2、多顺反子(polycistron) ;乳糖操纵子(lac operon)的结构;3、连续基因;E和D：邻氨基苯甲酸合成酶的两个亚基 A和B：色氨酸合成酶的α、β亚基 C:吲哚甘油磷酸合成酶;（二）真核生物mRNA的特点 ;2、断裂基因 ; ;由于氨基酸有20种，而核苷酸只有4种，其对应关系不可能是 1核苷酸→1氨基酸（41＝4，4＜20) 2核苷酸→1氨基酸（42＝16＜20) 但3核苷酸→1氨基酸（43＝64＞20）是可能的，这从理论上肯定了三联体密码子的结构形式。;Nirenberg等设计的实验：用化学合成的mRNA为模板，利用无细胞体系进行体外翻译实验：;M. Nirenberg P. Leder (1964. Science 145;1399);Ser-C14…. ;阅读框架 指mRNA中从特定位点开始的，一段含有翻译密码的碱基序列。 mRNA中的编码序列在被核糖体阅读和翻译时，从起始到终止都是以不重叠和不停顿的方式连续进行的，即从mRNA5’端开始，以三个核苷酸为一组的方式进行。因此，就有可能存在三种阅读框架，每一种框架只相差一个碱基的位移。三种框架的出现完全取决于哪一个核苷酸作为第一个密码子的第一个碱基。;开放阅读框架 指从AUG开始到终止密码子处的正确可读序列。 通常情况下，在三种框架中，只有一种能够正确地编码有功能活性的蛋白质，而其它的阅读框架往往由于频繁出现终止密码子而被封闭。所以，一般一条mRNA序列仅编码一条蛋白质多肽链。 ;阅读框架1;; 遗传密码（genetic code）： 是mRNA分子上按照5’→3’方向，每三个核苷酸与一种氨基酸对应，全部64种组合所形成的体系。 密码子（codon）： 每一个三联核苷酸的顺序称为密码子，也叫三联体密码。 每一个密码子与特定的一种氨基酸相对应。;终止密码（stop coden）： 也称无意义密码子（nonsense coden）：没有对应的tRNA的反密码子与之结合，但能被蛋白质合成的终止因子或释放因子识别，终止肽链的合成。 终止密码有3个：UAA、UAG、UGA 起始密码（initiation/start coden）： AUG，是多肽链翻译开始的第一个密码子，在链内部则作为蛋氨酸的密码子。;1、方向性: mRNA分子中遗传密码阅读方向是从5’端到3’端。;;3、兼并性与偏爱性 兼并性： 遗传密码的简并性通常是指密码子前两位碱基相同，第三位碱基不同仍编码相同的氨基酸。 同义密码子：编码相同氨基酸的密码子统称为密码子家族，其成员互称为同义密码子。 简并性现象决定了“同义突变”的存在，即DNA或mRNA序列中一个核苷酸的改变（点突变）可能并不影响其编码的多肽链中氨基酸的性质和序列。;偏爱性： 是指虽然多数氨基酸有一个以上的密码子，但这些密码子的使用频率各不相同。 原核生物和真核生物有着各自的密码偏爱性，如：脯氨酸的密码子有CCC（真核生物）和CCG（原核生物）； 某一种密码子的使用频率与细胞内相应的tRNA的丰度一致，二者之间的相互协调有利于细胞内某一氨基酸含量高的蛋白质的顺畅表达。 ;理论意义： 遗传密码的偏爱性可以作为基因表达调控的一种机制，例如基因序列中出现稀有密码子时，可以使蛋白质的生物合成受到延迟。 实践意义： 当人们期望人工合成的基因片段能在细胞内高效表达时，应考虑采用该细胞偏爱的密码子作为基因的密码子，以此来指导人类对基因的改造。 ;4、摆动性 是指在蛋白质生物合成过程中，密码子的第三位碱基总是处于一个不稳定的位置，它与反密码子的第一个碱基配对结合的强度不如前两个碱基，即“摆动碱基配对”。其结果是使一种tRNA分子可与一个以上的密码子碱基配对。;U A U;密码子、反密码子配对的摆动现象;5、通用性： 遗传密码的通用性是指从最简单的生物一直到人类，除个别细胞器的特殊密码子外，遗传密码都是相同的。 理论意义：这对进化过程中生物物种的稳定性及物种之间的相互联系与沟通是十分重要的。 实践意义：这对现代基因工程，利用低等细胞生成包括人类在内的高等哺乳动物基因产物提供了可能性。 ;二、蛋白质生物合成的场所;核糖体RNA的作用;3. 核糖体大亚基5SrRNA具有两个保守序列,其中一个与tRNA的 TψC环互补识别序列,另一个与23