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动物细胞工程细胞培养单克隆抗体养细胞融合胚胎移植核 移 植动物细胞工程动物细胞培养（1）动物细胞培养液成分 ？（2）动物细胞培养过程？ （3）区别: 原代培养与传代培养 细胞株与细胞系（4）动物细胞培养的应用？动物细胞融合有何同？不同？丧失感染活性 不感染细胞紫外线保留融合活性 诱导细胞融合物理法化学法生物法仙台病毒单个细胞？无性繁殖抗原→B细胞→抗体特异性结合单克隆抗体1、单克隆抗体？单：克隆：抗体：2、米尔斯坦和柯勒的实验方案实验目的:实验原理：实验材料：小白鼠实验器材：培养皿、针筒等等。实验过程：？制备单克隆抗体B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。单克隆抗体制备过程思考：（1）小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？（2）制备过程中应用哪些细胞 工程技术手段？ （3）在整个制备的过程中要经过几次筛选？细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活细胞融合技术、细胞培养技术Ⅰ筛选得到杂交瘤细胞，Ⅱ筛选先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞下培养筛选出特异抗体的细胞群单克隆抗体的应用应用: 疾病的诊断、治疗和预防。优点:特异性强、灵敏度高。实例:1、各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断；2、在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”，一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。3、若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。细胞株动物胚胎幼龄动物器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养原代培养一、动物细胞培养1、过程2、应用：细胞系病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体的生产，制皮肤细胞，检测有毒物质的毒性细胞全能性固体营养物质植物激素快速繁殖培养无病毒植株培养成植株细胞增殖液体营养物质动物血清培养成细胞株细胞系获得细胞产品、细胞3、植物组织培养和动物组织培养的比较比较项目原理培养基结果培养目的植物动物二、动物细胞的融合不同种类的动物细胞之间融合人与动物细胞之间融合物理化学去壁原生质融合克服远缘杂交不亲合物理化学生物制备单克隆抗体细胞分散细胞融合植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较比较项目原理方法诱导手段用途植物动物细胞膜流动性细胞融合特定培养基筛选效应B细胞骨髓瘤细胞灭活病毒体外培养体内培育三、单克隆抗体1、制备过程2、应用杂交瘤细胞疾病的治疗、预防、单克隆抗体诊断盒诊断疾病bd世界上第一只克隆羊“多莉”的培育过程如图所示，请据图回答：ace(1)图中的甲为苏格兰绵羊，乙为多莉羊。那么，a和b是通过_______分裂形成的，其DNA含量是体细胞的 _______；c肯定是__细胞，乙的遗传性状与提供___________的绵羊 一致.减数甲f一半体乙细胞核(2)产生 甲和乙的过程分别是—————和————（3）在形成乙是的过程中，需要将d的细胞核取出，将c细胞核移入d细胞内，此技术叫———。所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是————————————————————————（4）绵羊的白色对黑色为显色。若甲是白色绵羊，要判断它是否纯合体，选用与它交配的绵羊最好是————-------------------------有性生殖克隆bdace核移植卵细胞大，易于操作；卵细胞具有继续分化的潜能。甲f乙黑毛（5）在产生多莉羊时，需将e细胞形成的早期胚胎移入另一头母羊（f）子宫里，这种技术在细胞工程中叫————————（6）继植物组织培养后，克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞也有—————（7）在繁殖多莉羊的过程中，是否遵循孟德尔遗传规律？多莉羊的性状与d羊、c羊及f羊的关系是什么？——————————————bdac胚胎移植e全能性甲f乙 不遵循，多莉羊的多数性状象c羊，个别性状象d羊，发育也会受到f羊影响。四、动物胚胎移植可以使妊娠时间长、产仔数少的哺乳动物产仔率大大提高五、核移植在鱼类、两栖类中用核移植的方法克隆动物首次获得成功，目前又陆续培育出克隆牛、羊、兔等哺乳动物培养液 种类:液体培养基 成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、 维生素和动物血清等动物细胞培养分离细胞剪碎胰蛋白酶胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源）单个细胞洗涤、稀释、分离原代培养原代细胞传代培养细胞株遗传物质没有发生改变细胞系遗传物质发生改变十代左右单个细胞原代培养细胞40~50代左右原代培养：传代培养：细胞株：细胞系：10到40、50代的细胞，遗传物质没发生改变超过50代的细胞，遗传物质发生改变，可无限增殖应用：1、生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）2、检测有毒物质3、用于某些器官移植