实验三 酵母核糖核酸rna的提取.pptxVIP

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  • 2020-02-22 发布于上海
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一、实验目的;二、实验原理 ;(二)实验材料的选择;(三)RNA的化学组成的鉴定;三、试剂;8.地衣酚(3,5—二羟甲苯试剂):取比重1.19HCl 100ml,加入FeCl3·6H20 100mg及二羟甲苯100mg,混匀溶解后,置于棕色瓶中,此试剂必须在临用前新鲜配制。市售的3,5—二羟甲苯不能使用,必须用苯纯化结晶l~2次,并用活性炭脱色方可使用。 9.定磷试剂:2.5%钼酸铵溶液:20ml水溶解2.5克钼酸铵,加5mol/L H2S0430ml,用水稀释至l00ml,此试剂可在冷处保存一月不变质。;10. 10%抗坏血酸(Vc)溶液: 10g抗坏血酸溶于100ml水。贮棕色瓶中。溶液呈淡黄色尚可用,如呈深黄色即失效。 11.二苯胺试剂: 称取1.5g二苯胺(如不纯,须在70%乙醇中重结晶2次),溶于100ml冰醋酸(AR)中,再加入浓H2SO41.5ml, 摇匀,贮在棕色瓶中放冰箱内保存备用。 12.沉淀剂(钼酸铵—过氯酸试剂):0.25%钼酸铵溶于2.5%过氯酸中。如配200ml,即在 193ml水中加入7m170%过氯酸和0.5g钼酸铵。;四、操作步骤;2.核酸的水解:在含有核酸钠的离心管中加入5%硫酸2ml,用玻棒搅匀,沸水浴煮10分钟。 其中1ml水解液放进EP管里,贴好标签冷冻保存(下次试验用);3.核酸的鉴定 取水解液,按下表所列程序分别鉴定核酸的嘌

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