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- 2020-02-24 发布于上海
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要点;嘌呤(purine) ;;核酸的紫外吸收;减色效应;; 在研究核酸、核苷酸、核苷及碱基时,可以此对核酸进行定性及定量分析。另外,紫外线照射可引起DNA突变,也是由于存在于DNA中的核苷酸吸收紫外光所造成的。
;OD260的应用:核酸定量;核酸定量;DNA纯度;;溶解性:
RNA和DNA是极性的化合物都微溶于水不溶于乙醇乙醚、氯仿等有机溶剂。
在生物细胞内都与蛋白质结合成核蛋白。DNA核蛋白(DNP)与RNA核蛋白(RNP)的溶解度受溶液的盐浓度的影响而不同。
DNP溶于水和浓盐溶液,在1mol/L的NaCl溶液中溶解度比纯水高2倍,但在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,仅为水的1%,几乎不溶解;
RNP在盐溶液中其溶解度受盐浓度的影响较小,在0.14mol/L的NaCl溶解度较大。因此,在核酸的提取中,常用此法将两种核蛋白分开,然后用蛋白质变性剂去除蛋白质。;核酸的热变性与复性;变性引起紫外吸收值的改变;RNA随温度升高碱基堆积会逐渐减少,光吸收值会逐渐地、不规则地增大。
dsDNA升温过程中,分子末端及内部富含A-T的区域的变性将会使其附近的螺旋变得不稳定,从而导致整个分子结构在一个确定的温度共同变性,这一温度取过渡期的中点值,称为解链温度(melting temperature),以Tm表示。
;;Tm值计算公式为: Tm=69.3+41(G
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