dna提取和制备解读.pptxVIP

第一部分 DNA提取总论;一、提取DNA总的原则：;二、样本来源：;血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体液、棉拭子采集的各种分泌物、组织（包括骨髓）和羊水等都是分子诊断的检验材料，其中全血、血浆（血清）标本占分子诊断的60%以上 ;DNA提取前样本采集、预处理和保存：;（二）血浆和血清;三、DNA的收率;四、DNA提取的基本步骤;五、DNA提取试验中常遇到的问题;DNA降解的原因 样本不够新鲜，采集材料过陈旧 样本本身存在大量DNA酶 提取DNA的生物活性差的原因？ 提取的基因组DNA盐浓度过高 基因组DNA中乙醇未清除净 基因组DNA中可能存在其他抑制因素 提取基因组DNA，有时加入蔗糖的原因 加入多糖，保护DNA长度;不可忽视的细节  —血液基因组提取;没有严格要求: PCR Southern Blots RFLP;没有严格要求 常规PCR;基因组提取方法;样本保存和前处理－抗凝血液;样本保存和前处理－非抗凝血;样本保存和前处理－白膜层;样本保存和前处理－血清/血浆;样本保存和前处理－微量血液/干血点/羊水/胸水;样本保存和前处理－口拭子/漱口水;基因组提取流程;红细胞裂解;核细胞裂解;核酸吸附或沉淀;核酸洗脱或溶解;浓度：100－300ng/ul 纯度：任何杂