lowrys法folin酚试剂法顺德.pptxVIP

怎样测定血清中蛋白质的含量蛋白质含量测定的常用方法比较方 法 灵敏度 优点 缺点凯氏定氮法0.2~ 1.0mg氮 干扰少，准确操作复杂，费时 紫外吸收法50～100mg 快速简便无损样品灵敏度低干扰物较多考马斯亮蓝法（Bradford）法1～5ug 灵敏、简便、快速不同蛋白质测定时有较大的偏差 双缩脲法 1～20mg 干扰相对少，较快灵敏度低Lowry法20～250ug 灵敏度高干扰物质多、费时、操作严格计时选择测定方法时应考虑1、实验对测定所要求的灵敏度和精确度；2、蛋白质的性质；3、溶液中存在的干扰物质；4、测定所花费的时间等。Lowry’s法（Folin-酚试剂法）测定蛋白质含量Determination of protein content by Lowry‘s method实验目的1、掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理 及其实验操作技术。2、掌握制作标准曲线的要领和通过标准曲线 求样品溶液中待测定物质含量的方法 。原理1921年，Folin 首创，利用蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基（酚基）还原酚试剂（磷钨酸-磷钼酸）起蓝色反应。1951年，Lowry对此法进行了改进，先于标本中加碱性铜试剂，再与酚试剂反应，提高了灵敏度。原理第一步：双缩脲反应 在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲