诊断学临床常见病原体检测.ppt

药物敏感试验 耐药筛选试验：以单一药物、单一浓度检测细菌耐药性。 折点敏感试验：是仅用特定抗生素检测细菌耐药性。 药物敏感试验 报告方法： 敏感(susceptible，S) S ：测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。 耐药(resistant，R) R：测试菌不能被在体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制。 药物敏感试验 中度敏感(intermediate，I) I：测试菌能被测定药物大剂量给药后在体 内达到的血药浓度所抑制或在测定药物浓集部位的体液(如尿 )中被抑制。 最低抑菌浓度（Minimal inhibitory ncentration MIC) MIC ：够抑制 检测菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为最低抑菌浓度。 执行标准均来自临床实验室标准协会（CLSI） （一） 概 念 耐药性（drug resistance）：是指细菌对药物所具有的相 对抵抗性。 固有耐药性（intrinsic resistance）：是由细菌染色体基 因决定而代代相传的耐药，如肠道杆菌对青霉素的耐药。 获得耐药性（acquired resistance）：是细菌与药物反复接触后对药物的敏感性降低或消失，大多由质粒介导其耐药性，但亦可由染色体介导。 （二）耐药性病原体 1、耐甲氧西林葡萄球菌（MRS） 2.氨基糖苷类抗生素高耐药和耐万古的肠球菌（VRE） 3.耐青霉素肺炎链球菌（PRSP） 4、超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌（ESBL） 5、多重耐药或泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动相菌 6、耐拉米夫定和泛昔洛韦的乙肝病毒。 （三）耐药机制 1、细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统； 2、产生抗生素灭活酶或钝化酶； 3、改变药物的作用靶位； 4、外膜通透性下降； 5、主动外排系统过度表达； 6、形成生物膜及外源耐药基因的获得。 细菌的多种耐药基因可协同作用，导致多耐药菌株的出现。 （三）耐药机制 （四）耐药菌检测的意义 耐药菌检测 意 义 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA） 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSE） 对全部β一内酰胺类抗菌药物，包括青霉素族和头孢菌素族对氨基糖甙类、大环内脂类、克林霉素和四环素等抗生素多重耐药。 治疗首选药物为万古霉素 氨基糖苷类抗生素高耐药肠球菌 提示氨基糖苷类细胞壁的抗菌药物如青霉素类合用治疗无效，有助于临床调整和重新确定治疗方案。 （四）耐药菌检测的意义 耐药菌检测 意 义 耐青霉素的肺炎链球菌 肺炎链球菌对氨苄西林、 氨苄西林/舒巴坦、 头孢克肟、 头孢唑啉的临床治疗疗效很差，治疗时参考药敏结果选择药物，经验治疗重症感染时，可用头孢曲松或头孢噻肟联合万古霉素用药。 超广谱β-内酰胺酶（大肠、肺克） 2010更改部分头孢菌素的折点后，病人的结果不需修改。 院内感染控制仍需报告ESBL （四）耐药菌检测的意义 耐药菌检测 意 义 β-内酰胺酶 1、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及卡拉莫拉汉菌等阳性，表示对青霉素、氨卞西林以及阿莫西林耐药。 2、葡萄球菌属以及肠球菌属等，阳性表示对青霉素、氨基组青霉素、羧基组青霉素以及脲基组青霉素耐药 （四）耐药菌检测的意义 检出耐药菌需采取的重要措施： 接触隔离！！ （五）病原体耐药基因检测 耐药基因的产生：1、获得外源性基因 2、细菌自身基因突变 细菌耐药基因检测方法：PCR法、生物芯片、PCR-RFLP分析、 动测序、PCR-SSCP分析 三、临床常见病原体检测 细菌、病毒、真菌、寄生虫、支原体、衣原体以及立克次体等。 （一）细菌感染检查项目的选择 细菌感染 抗原抗体检测 PCR技术 基因探针技术 培养 涂片镜检 （二）病毒感染检查项目的选择 电镜检查 核酸检测（PCR） 细胞培养 特异性抗体检测 （三）真菌感染检查项目的选择 真 菌 培养 涂片镜检 抗原检测 灾光定量PCR 核酸杂交技术 rDNA序列测序 基因组核酸电泳 核型分析 G试验 GM试验 （四）寄生虫病 病原学诊断 免疫学诊断 寄生虫