核医学放射性标记化合物.pptxVIP

放射性核素标记化合物是化合物分子中某一原子或某些原子被放射性核素原子所取代的化合物，是进行机体微量物质测定和示踪研究重要的分析试剂和示踪剂。 要求：引入放射性核素后应该保持化合物原有的理化、生物学性质不变。 ;标记物举例 ①3H-TdR，研究细胞增殖； ②药物、蛋白、核酸的标记示踪研究； ③细胞标记：如RBC标记，将分离的RBC加入Na2 51CrO4约1850-2775KBq，室温放置30分钟，以生理盐水洗涤，就得51Cr-RBC，可测血容量或研究RBC寿命。;3;4;5;6;7;8;9;10;11;12;13;14;缺点： a、中心原子往往用该法难以标记上，如氚、碘常用于交换标记，而14C标记化合物由于反应条件高，不易用此法制备。 b、通常条件下能交换的系统，不一定都能制备标记物。 c、仅有几个位置可交换，专一性差。 d、原料含杂质也含交接位置，易形成放射性杂质。;16;17;18;19;20;21;22;23;24;25;（二）碘标记方法及分类： 1、氯胺-T法： CH-T叫N-氯代对甲苯磺酰胺钠盐，为温和氧化剂。它在水中产生次氯酸，次氯酸可使碘离子变为碘分子125I2, 125I2可心置换酪氨酸残基苯环上的H，而加入偏重亚硫酸钠可中止氧化反应。;27;28;29;30;31;32;33;5、核酸碘标记： 即探针，原理同上。 举例：DNA的125I标记技术。操作程序 ①DNA常规提取纯化； ②DNA加热（70℃），分为单股DNA； ③用TLCL3将Na125I氧化产生125I2 ④调PH4.7，125I将取代嘧啶环上第5位的碳原子，形成共价结合的DNA单链。 ⑤降温，恢复双股DNA得125I-DNA； ⑥纯化。;35;36;常用测定方法： 1、纸层析法：混合样品中各组分的性质不同，在固定相上的吸附能力和在流动相中的溶解度不同，因此它们各自的移动速度不同，可在特殊纸片上分离开。 常用：比移值Rf表示各组分的移动速度快慢。;38;展开实验注意问题 ⑴层析纸长度，一般20cm左右，越长分离越好； ⑵展开剂要精心设计，选2-3种进行验证。要求：能把 混合物很好的分开，用时还要组成简单，粘度小，展开 快，展开后易挥发，价格低，易购买。 ⑶点样斑大小适当。 ⑷点样斑不能碰到展开剂的液体。 ⑸层析缸要有盖，减少干扰。 ⑹分段测量，段的大小要一致； ⑺起??点所在段也要测量。 ⑻高比活度样品点要加载体，减少吸附。;40;标记化合物主要质量指标（5个） 1，放射性核素纯度，2，放化纯度、3，放射性比活度、4，生物活性5，免疫活性及标记位置 放射性核素纯度及其检查 所需放射性核素的活度 放射性核素纯度（%）=------------------------- % 样品的总放射性活度 ;42;43;（五）?放射性比活度及测定 放射性活度 比活度 = ----------------------- 单位化学量 ? 比活度的理论值=λN=0.693N/T1/2 （理论上有多少原子核就应该有多少次衰变） 测定：（1）? 直接测定 （2）层析扫描面积计算法;45; ;47;48;49;50;51