实验五dna限制性酶切和琼脂糖凝胶电.pptxVIP

限制性内切酶EcoR I Restriction Enzyme识别序列： ------G↓AATT C ------ ------ C TTAA↓G ------Hind III Restriction Enzyme识别序列： ------ A↓AGCT T ------ ------ T TCGA↓A ------ 每一种限制性内切酶都有特定的反应条件 pH范围：7.5~8.0 缓冲液组份: Tris(三羟甲基氨基甲烷） NaCl、MgCl2、 巯基乙醇 温度：37℃琼脂糖凝胶电泳 是一种简便、快速的分离纯化和鉴定核酸的方法。 琼脂糖是一种线性多糖聚合物。琼脂糖粉末加热到熔点后冷却凝固,会形成良好的电泳介质。电 泳 在电场的作用下，在某种支持介质上，将一个混合物分离成若干条区带的过程。琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围琼脂糖浓度(%)线型DNA分离范围(Kb)0.35～600.61～200.70.8～100.90.5～71.20.9～61.50.2～312.00.1～2试 剂TBE电泳缓冲液 45mmol/L Tris-硼酸，1mmol/L EDTA，pH 8.0加样缓冲液 0.25%溴酚蓝（深蓝色，300bp) 0.25% xylene cyanlo FF （天蓝色，2000bp） 40%蔗糖EB（溴化乙锭）染色液（有毒） 0.5ug /