实验五 细菌生理生化实验）.pptVIP

实验结果观察时间安排：下周一晚上 ：5:30----6:00（1，2班）  6:10---6:40（3，4班） 观察记录实验结果完成实验报告并上交 实验结果观察时间安排：本周六下午：2:00----2:40（1，2班 3:00----3:40（3，4班） 观察记录实验结果完成实验报告并上交 实验五 细菌在培养基中的生长表现及生理生化试验 一、实验目的 进一步熟悉细菌在固体培养基中的生长表现，了解在液体培养基中的生长表现，了解某些生化反应的操作方法及其原理，从而加深对细菌生理和细菌鉴定的理解。 二、实验程序 病料分离培养→纯培养→接种生理生化培养基 37℃ 24-48h 鉴定 三、实验器材 实验分组：2人/小组，每小组接种一套生理生化培养基。 四、生理生化鉴定内容(最好对纯培养物再次作镜检，以保证其纯度) 四、生理生化鉴定内容 1. 单糖发酵管接种： 葡(红) 乳(黄) 麦(兰) 甘(白) 蔗(黑) 四、生理生化鉴定内容 2. 生理生化培养基接种： (1)普通肉汤37℃ 24-48h 生长观察及Indole试验 (2)蛋白胨水37℃ 24-48h Indole 试验 (3)葡萄糖蛋白胨水37℃ 24-48h MR/VP (4)三糖铁培养基37℃ 24-48h 观察底层/斜面是产酸,还是产碱，底层是否产气/H2S 斜面/高层 产气；H2S 五、结果判定： 1. 单糖发酵试验： 产酸，培养基变黄，记为“+” 产酸产气，培养基变黄，含有气泡，记为“⊕” 培养基不变色，记为“-” 五、结果判定： 2. 观察在肉汤中的生长表现：是否混浊，是否出现沉淀及能否形成菌膜或菌环。 五、结果判定： 3. Indole试验:在已培养好的肉汤或蛋白胨水中加入乙醚约1ml，用力摇匀，待乙醚上浮后，再沿管壁缓慢加入Indole试剂数滴，若在乙醚层内显红色，为阳性，记“+”。 4. MR试验：在已培养好的葡萄糖蛋白胨水中加入MR试剂5-6滴，凡液体变红者判为阳性，记“+”，呈黄色者为阴性，记“-”， 呈橙黄色者为可疑，记为“+”。 5. VP试验：在葡萄糖蛋白胨水中加入等量的VP试剂，混合，强阳性者5分钟之内可产生粉红色反应，记为“+”，不变色者需培养过夜，再行观察，若仍不变色则判定为阴性，记为“-”。 6. 三糖铁培养基中生长观察： 斜面: 培养基变黄产酸记为“A”，培养基变红产碱记为“K”。 高层：产气记为“+”，不产气记为“-”。 培养基变黑，产H2S，记为“+” ，阴性为“-”。 ? 斜面/高层 产气；H2S K/A +；- 五、结果记录： ?