肉制品7-9--菌落总数的测定 .pptVIP

任务7-9 肉制品菌落总数的测定 菌落总数可用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣，也在一定程度上影响着食品的保质期的长短。 一、任务目标 1、知道样品处理的方法。 2、学会菌落总数的检测方法，能检测肉制品的菌落总数。 3、会计算并报告菌落总数。 二、任务分析与实施 1实验试剂 1.1 平板计数琼脂培养基 1.2磷酸盐缓冲液 1.3 氢氧化钠溶液(1mol/L):参考GB/T601规定的方法配制，不需要标定。 1.4 盐酸溶液(1mol/L):参考GB/T601规定的方法配制，不需要标定。 1.5 75%消毒酒精 2.仪器设备 天平、冰箱、恒温培养箱、高压灭菌锅、恒温干燥箱、培养皿、均质机、锥形瓶、报纸或牛皮纸、无菌均质袋等。 3.检验步骤 3.1 样品的稀释 3.2 培养 待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板进行培养。 4 菌落计数 可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（colony-forming units，CFU）表示。 4.1 选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。 4.2 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。 4.3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。 5.结果与报告 5.1 菌落总数的计算方法 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）样品中菌落总数结果。 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按下式计算： 式中： N——样品中菌落数； ΣC——平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和； n1——第一稀释度（低稀释倍数）平板个数； n2——第二稀释度（高稀释倍数）平板个数； d——稀释因子（第一稀释度）。 若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。 若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。 若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU～300CFU之间，其中一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 5.2 菌落总数报告 菌落数小于100CFU时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。 菌落数大于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。 若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。 称重取样以CFU/g为单位报告。