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- 2020-03-10 发布于上海
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实 验 四 酵母核糖核酸的分离与组分鉴定(P159);;酵母核酸中RNA含量较多;
一般提取的RNA主要是rRNA,与蛋白结合在一起形成核糖核蛋白(RNP);
RNA溶解性:溶于水,溶于稀酸、稀碱溶液,不溶于乙醇、乙醚和氯仿等一般的有机溶剂;
RNA的等电点在2.0-2.5,DNA的等电点在4.2左右;
碱提法、盐提法
在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀,由此得到RNA的粗制品。
;核糖核酸含有核糖、碱基(嘌呤碱、嘧啶碱)和磷酸各组分。
加硫酸煮沸可使其水解,从水解液中可以测出上述组分的存在。
磷酸+钼酸铵 → 磷钼酸铵↓
核糖+地衣酚试剂→ 墨绿色化合物
嘌呤碱+硝酸银→ 嘌呤银化物(白色);【试剂和器材】;【试剂和器材】;(一)RNA的提取;RNA粗制品+ 5mL1.5mol/LH2SO4,沸水浴加热10min,制成水解液。
组分鉴定
嘌呤碱:1mL水解液+5滴浓氨水+ 1mL0.1mol/L AgNO3,观察有无白色絮状嘌呤银化物沉淀。
核糖:1mL水解液+2mLFeCl3-HCl+0.2mL苔黑酚乙醇,沸水浴3min,观察溶液有无墨绿色出现。
磷酸:1mL水解液+1mL定磷试剂,沸水浴3min,观察溶液中有无蓝色沉淀生成。;说明各试管中现象
解释原因
得出结论;RNA提取实验过程中各操作步骤的作用是什么?
心得
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