移植免疫学与免疫学检验.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * 细胞学分型 利用混合淋巴细胞培养（MLC）的方法来判定HLA-II类抗原，分为双向和单向混合淋巴细胞培养。传统上用于对HLA-D抗原分析，HLA-D抗原又被称为LD抗原。 细胞分型的特点 1. 用于分型鉴定的标准细胞株的来源和保存都比较困难，而且混合淋巴细胞培养实验本身操作繁琐耗时，使其难以广泛推广，目前正逐渐被基因分型方法所取代。 基因分型 1. 基因分型是根据不同HLA等位基因之间DNA序列的差异判断个体间的HLA基因型，与前两种方法相比，基因分型法并不要求活的淋巴细胞，任何组织来源的含基因组DNA的细胞均可用来做HLA分型。 2.主要包括四种： PCR-RFLP: PCR－限制性片断长度多肽性分型法; PCR-SSP: PCR－序列特异性引物分型法; PCR-SSOP: PCR－序列特异性寡核苷酸探针杂交法； PCR-SBT: PCR－序列测定法； 聚合酶链反应（PCR） 在多聚合酶，引物，底物和模板的参与下通用变性，退火，延伸三个循环步骤在短时间内达到对目的片断的大量扩增，是基因 分型的基础。 SSP/RFLP DNA 提取  DNA 扩增  (限制性内切酶酶切)  检测 SSOP DNA 抽提