国家标准GB_食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法.pdfVIP

亚硝酸盐与硝酸盐的测定 格里斯试剂比色法 (摘 自GB/T5009.33-1996) (一)亚稍酸盐测定 原理 样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-禁基 乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。 2 试荆 实验用水为蒸馏水，试剂不加说明者，均为分析纯试剂。 2.1抓化馁缓冲液:1L容量瓶中加人500mL水，准确加人20.OmL盐酸，振荡混匀，准确加人50mL 氢氧化馁，用水稀释至刻度。必要时用稀盐酸和稀氢氧化按调试至pH9.6-9.7, 八 勺 2 … ‘ 一 硫酸锌溶液(0.42mol/L):称取120g硫酸锌(ZnSO,·7H}O)，用水溶解，并稀释至1000mL, 门 ﹃ 乙 J 氢氧化钠溶液((20g/L):称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L, 0 月 走 乌 对氨基苯磺酸溶液:称取10g对氨基苯磺酸，溶于700mL水和300mL冰乙酸中，置棕色瓶中混 匀，室温保存。 2.5 N-1-蔡基乙二胺溶液((1g/L):称取。.1gN-1-蔡基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀释至100ml， 混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。 2.6 显色剂:临用前将N-1-禁基乙二胺溶液((1g/L)和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。 2.7 亚硝酸钠标准溶液:准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移人 500ml,容量瓶中，加100ml.抓化铁缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。此溶液每毫升相 当于500pg的亚硝酸钠。 2.8 亚硝酸钠标准使用液:临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1.00mL,宜于100mL容量瓶中，加水稀 释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0fag亚硝酸钠。 3 仪器 3门 小型粉碎机。 3.2 分光光度计。 4 操作方法 4.1 样品处理 称取约10.00g(粮食取5g)经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70mL水和12ml氢氧化钠溶液 (20g/L),混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品pH=8，定量转移至200mL容量瓶中加10mL硫酸 锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2-5mL氢氧化钠，混匀。置60℃水浴中加热10min，取出后 冷至室温，加水至刻度，混匀。放置0.5h，用滤纸过滤，弃去初滤液20mL，收集滤液备用。 4.2 测定 4.2.1 亚硝酸盐标准曲线的制备:吸取0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL亚硝酸钠标准使用液(相当 于。,2.5,5,10,15,20,25pg亚硝酸钠)，分别置于25mI，带塞比色管中。于标准管中分别加人4.5ml. 氯化按缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加人5.0ml显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min, 用 1cm比色杯(灵敏度低时可换 2cm比色杯)，以零管调节零点，于波长 550nm处测吸光度，绘制标 准曲线 低含量样品以制备低含量标准曲线计算，标准系列为:吸取。,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0mL亚硝酸钠 标准使用液(相当于。,2,4,6,8,10pg亚硝酸钠)。 4.2.2 样品测定:吸取 10.0ml,上述滤液((4.1)于25mL带塞比色管中，自4.2.1“于标准管中分别加 人4.5m工氯化钱缓冲液”起依法操作。同时做试剂空白。 5 结果计算 亚硝酸盐含量按式(1)计算 : x 卜 1000 - 矶 ·..·..·..·..·.…… (1) - 叭 m1X 又 1000 式中:X,— 样品中亚硝酸盐的含量,mg/kg; ，，一一样品质量，9; m 测定用样液中亚硝酸盐的质量，119; V,-一 样品处理液总体积,mL; V— 测定用样液体积，mLa 结果的表述 :报告算术均值的二位有效数。