细胞拆合与重组2.pptxVIP

4.6 动物细胞核移植;4.6.1 克 隆; 1997年3月，世界卫生组织 克隆——遗传上同一机体或细胞系（株）的无性生殖。 ;全能性(Totipotency);分化细胞之全能性;4.6.2 鱼类、两栖类的细胞核移植;1955 豹蛙(Rana pipiens) ;1958-1962年，英, John Gurdon和Machineer 爪蟾小肠上皮细胞核移植到未受精 的卵细胞中，培养出可育的爪蟾 ;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;1970年,John Gurdon 用青蛙作材料脚蹼角质化细胞进行细胞核移植试验，蛙卵发育成了蝌蚪 ;4.6 动物细胞核移植;中国鱼类、两栖类动物克隆历史;1978 黑斑蛙 (童第周); 1979年，中国科学院武汉水生生物研究所;1989年，童第周、牛满江;4.6.3 哺乳类的细胞核移植;显微操作仪（micromanipulator);1977年，美国，杰克逊实验室;1981年，Illmensee和Hoppy;Illmensee Hoppe的克隆小鼠实验;; 克隆小鼠实验步骤;A. 供核胚胎的制备 ;B. 受体受精卵的制备;C. 细胞核移植;D. 克隆鼠的培养;1983年，Mcgrath和Solter首次利用显微操作技术和细胞融合技术，将单细胞期小鼠胚胎作为核供体进行核移植，得到了产仔，并建立了重复性很高的核移植程序，使得核移植效率大大提高。 Cheong等（1993）发现细胞周期早期的胚胎细胞核在受体细胞质中可以发生发育程序的重排，核移植胚胎的发育率明显提高。 有研究表明，小鼠囊胚期的滋养层细胞与ICM细胞一样具有发育的全能性（Tsunda Kato, 1997; Sotomaru et al., 1999）。 ;哺乳动物克隆方法;胚胎分割;胚胎细胞核移植;胚胎干细胞核移植;胎儿成纤维细胞核移植;体细胞核移植; 多利羊（Dolly)风暴 ;多利羊成为明星;多莉与它的假母;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;克隆“多利”成功;研究发现： 在供体核植入受体胞质后，不管是供体还是受体，处在分裂中期时更容易恢复全能性，原因可能有两个;1、如果供体核处于分裂中期，则供体核由于核膜的缺失， 使得受体的调控因子更容易与供体核发生接触而发生作 用。 ;2、如果受体处于分裂中期，则受体存在许多因子可以使得 供体核的核膜消失，从而调控更容易其作用，??能性更 容易恢复 ;“多利”的生物学意义;1998年7月，美国，夏威夷 大学 Ryuzo Yanagimachi 复制了五十几双不同世代的 老鼠 ;胚胎成功发育的关键;4.6 动物细胞核移植;4.6 动物细胞核移植;1997年5月，Wilmut等 人类血液凝结因子成功的选殖到两只复制羊， Molly及Polly。 ;多利和它的三个孩子;尚未弄清的疑惑;4.6.4 克隆技术的应用与意义;（1）技术尚不成熟 成功率低 夭折率高;几个影响因素;2、线粒体问题 目前还不知道原本就存在于卵子里的线粒体到底在多大 程度上与个体的性质有关，细胞核的遗传基因与线粒体 的遗传基因相互影响的问题必须引起重视。;3、核的重新编程不完整，染色体倍数不正确、性别等都可 能对克隆动物的质量产生影响，因为目前所得到的体细 胞克隆动物大多为雌性，因此性别可能对体细胞克隆的 成功率一定的影响。;（2）克隆动物体细胞突变、寿命及其他遗传问题;（3）是否是完全的复制;克隆动物可应用性的思考;社会学和伦理学问题;4.6.6 克隆动物的现状和发展趋势;动物克隆存活率低、发育异常原因