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代谢工程 1: metabolic control analysis (MCA) 代谢控制分析 ; method 1: metabolic control analysis (MCA) 代谢控制分析 ; MCA的 基本理论 MCA的基本研究对象是由代谢反应步骤和代谢反应途径组成的代谢系统,单个反应步骤是组成系统的基本单元。 MCA 认为代谢系统中所有反应步骤都对代谢通量和代谢物浓度进行控制, 因此对其中一个反应步骤施加微扰而产生的代谢通量(或代谢物浓度)变化的大小,可以作为代谢系统分析理论的基本概念。 再结合直线式代谢系统的结构约束条件,可以导出总和原理和连通原理。;1)控制系数 是对代谢系统中某一步反应施加一个微小扰动,所引起代谢通量或代谢物浓度的相对变化与该反应的反应速度 v 相对变化之比,即:CA=(dA/A)/(dv/v)
式中A--代表代谢通量, CA---通量的控制系数。
例如:A代表代谢物的浓度,则CA 为该步骤代谢物的浓度控制系数。 表示每一步骤对控制作用的强弱。越小越好。
2)弹性系数 是指对某一步反应的某一参数 p(如底物、产物、酶浓度、温度、效应物等)进行微扰,所引起的反应速度 vi的相对变化与参数的相对变化之比。
弹性系数 = (dv/v) / (dA/A),
即越大越好,即对反应的影响越大。;;;;;;;;;;染菌的防止;培养基与设备灭菌;限速酶--- 4-羟基苯甲酸-聚异戊二烯焦磷酸转移酶, 主要负责催化pHB 与PPP的缩合反应。该酶专一性不强, 在E. coli中主要是由ubiA 基因编码; 在Saccharomyces cerevisiae 中由coq2 基因编码; 在S chizosaccharomy ces pombe 由ppt1基因编码。
Zhang 等将来自E. coli、S. cerevisiae、S. pombe 的ub iA、coq2、ppt1基因转化到A. tumefaciens 中,结果发现能够表达ubiA、coq2、ppt1基因的重组A.tumefaciens 的CoQ10的含量得到较大提高。
5-磷酸脱氧木酮糖合成酶( DXS)是MEP代谢途径上合成DPP的限速酶。通过在E. coli中过量表达来自P seudomonas aerug inosa, Bacillus subtilis 或Synechocy stissp. 6803 的DXS 基因, 可以使得大肠杆菌的CoQ 合成量得到提高。
;;;;;;谢谢!
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