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辣椒红色素的提取和检测;一、实验目的;;; 辣椒中含有强烈辛辣味的辣素(辣椒碱),含量
一般为0.2%~0.5%。固态辣椒碱是白色或淡黄色针
状晶体,不溶于水,易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿。
辣椒碱都是酰胺类化合物,通式为
O OCH3
R-C-NH-CH2- -OH
其酚羟基具有弱酸性,可溶于NaOH溶液中。
用有机溶剂提取红辣椒中的辣椒红色素过程中,
需先除去辣椒碱,提取得到的辣椒色素经浓缩、干燥
后,可用薄层色谱进行分析分离,由分光光度法测定
辣椒红色素的色价及含量。
; 仪器:
圆底烧瓶(250mL),索氏提取器,直型水冷凝管,蒸馏
头,层析缸,CMC硅胶薄层板(5×15cm玻璃板),烧杯(250
mL),锥形瓶(100mL),试剂瓶(100mL),量筒(100mL),点
滴板1个,温度计(100℃),电热套,恒温水浴锅,722光栅
型分光光度计,药物天平,电子天平,组织捣碎机,电吹
风,剪刀(公用),玻棒,铅笔,小尺子(自备)。
试剂:
红辣椒干、95%乙醇,丙酮,石油醚(沸点30~60℃),
15%NaOH溶液。
材料:
毛细管,沸石,纱布,脱脂棉,滤纸,擦镜纸,pH试
纸。;四、实验步骤;2、辣椒色素的提取
置于索氏提取器的滤纸筒中装入辣椒,筒上口放一小团脱脂棉;250mL洁净的圆底烧瓶中加入120mL95%乙醇和几粒沸石,加热进行抽提五次以上(提取液颜色很淡时即可停止抽提)后,将提取装置改成常压蒸馏装置,蒸出大部分乙醇(约剩余5~6mL乙醇)。将残液及少量馏出液洗烧瓶的洗涤液倾入已准确称出重量的试剂瓶中,在100℃烘干后称重,计算提取率。; 3、薄层色谱分析分离
取少量干燥的辣椒色素于点滴板上,用适量石油醚溶
解。用平口毛细管吸取辣椒色素溶液点样在两个点样原点
上,点样2~5次,点样后的斑点直径小于3mm,用石油醚
(沸点30~60℃)与丙酮10︰1(体积比)的混合液作展开剂展开。
展开后取出薄层板,立即划出前沿位置,电吹风吹干除
去展开剂,轻画出各斑点的位置、观察斑点颜色并计算Rf
值,并根据薄层色谱展开图以及它们的结构确定这三个斑点的归属。
4、辣椒红色素的色价测定
准确称取0.0020g(精确到0.0002g)辣椒色素,用丙酮
溶解并定容成25mL,以丙酮作参比,测定460nm处的吸光
度,计算 来确定辣椒红色素的色价,换算 ,计算辣
椒红色素的含量。;提取器的滤纸筒中:
去除辣素的辣椒粉
圆底烧瓶中:180mL 15%NaOH溶液
沸石3~3粒;五、实验关键; 操作注意事项
1、固-液提取和常压蒸馏时,应加沸石,冷却
水应低进高出。
2、滤纸筒的直径应略小于提取器内径,其高
度应高于虹吸管,低于蒸气上升管。
3、只能用铅笔在薄层板上轻轻画出点样原点,
点样量不能过多或太少,以免影响展开效果。展
开结束后,应立即画出前沿位置。
4、测量吸光度时,需用待装溶液充分洗涤比色
皿;使用后必需洗净比色皿。
5、使用过的展开剂倒入指定的回收瓶中。;六、思考题;七、作业;
愿每位同学掌握好在本课程学习中
学得的实验操作技能,在后续课程的实
验和研究型工作中进一步提高和完善,
成为一名有创新能力的应用型人才。
欢送各位进入大二学习!
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