RNA的生物合成PPT课件2.pptx

RNA的生物合成;DNA;模板和酶 Templates and Enzymes;一、转录模板 ;5′···GCAGTACATGTC ···3′;;不对称转录 (asymmetric transcription) ;二、RNA聚合酶;RNA聚合酶;其他原核生物的RNA聚合酶均与E. coli相似;三、RNA聚合酶与启动子;RNA聚合酶结合模板DNA的部位，称为启动子(promoter);RNA聚合酶保护法;; 起始部位：指DNA分子上开始转录的部位，该部位含有与转录新生成的RNA链第一个核苷酸互补的碱基，将该碱基的序号定为+1;转录过程 The Process of Transcription;2. 不需要引物，转录第一位：5′-pppG -OH (GTP) ;（二）转录延长;5’;1.非依赖Rho (ρ)的转录终止子 序列特征：回文序列富含GC，且在下游为连续的A 2.依赖Rho的转录终止子 序列特征：回文序列GC含量相对较少，下游序列无明显特征;;茎环结构使转录终止的机理;依赖 Rho因子的转录终止;;第三节 真核生物RNA的生物合成; 真核生物转录的调控是基因表达调控的关键，也是当今生命科学研究的热点问题 许多疾病例如癌症、心脏病以及不同型态的发炎都与转录过程受到干扰有关 真核细胞转录系统的高度复杂性造成了生物体系分化的多样性。例如：想要发挥干细胞在医疗上的功能，就必须掌握转录的控制机制 转录是基因表达的核心步骤，如果转录 中断，生物体很快就会死亡;一、真核生物基因转录概述;真核生物RNA聚合酶（三种）;Review：rRNA的种类（根据沉降系数）;RNA聚合酶Ⅱ 与转录因子 羧基末端结构域(CTD)： 1、位置：RNA聚合酶Ⅱ最大亚基羧基末端 2、结构特点： （1）具有7个氨基酸(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser -Pro-Ser) 的重复序列（酵母：重复26次；哺乳类：52次） （2）多个磷酸化位点：Ser、Thr ; CTD磷酸化对调控基因转录有重要作用： （1）CTD去磷酸化，RNA聚合酶II易与DNA 结合，这种构象适于转录的起始 （2）CTD磷酸化可使RNA聚合酶II与DNA的 结合变得松弛，形成适于延伸的构象 ;RNA聚合酶II自身不能起始转录，需要依靠转录因子的协助;转录因子 ;RNApol II 的转录因子 TF II D TBP（TATA盒结合蛋白） + TAFs（TBP协同因子 ） —— 结合在DNA小沟（其他DNA结合蛋白为大沟），识 别和结??核心启动子(TATA盒和Inr) TF II A —— 含数个亚基，可能通过解除TAFs的抑制而激活TBP TF II B —— 覆盖靠近起始点的启动位置，C端与TFIID和DNA 的复合物结合，N-端与TFⅡF协同作用募集RNA聚 合酶II ;TF II F ——结合Pol II并带向启动子；RAP74（ATP依赖性解旋酶），RAP30（与细菌σ因子有同源性） TF II E —— 扩大DNA覆盖区至+30 TF II H 和TF II J —— H有激酶活性， 使Pol II 的CTD 磷酸化 ，PolⅡ 离开启动子区;（1） TFIID: TBP（TATA盒结合蛋白） + TAFs（TBP协同因子 ） ;TBP的作用----定位因子 a、在TATA框处与DNA结合 b、是所有三种RNA聚合酶转录起始所需的因子; TBP的作用机制： a 、两个结构域形成一个完全二元对称的马鞍型 结构，与DNA小沟有效结合; b、TBP 与DNA 结合，使DNA 弯曲了约80°， TATA 盒向大沟弯曲，拓宽了小沟。;（2） TFIIA 含有至少3个亚基 与TFIID结合，稳定TFIID-DNA复合体；可能通过解除TAFs的抑制而激活TBP;（3） TFIIB 覆盖靠近起始点的启动位置，C端与TFIID和DNA的复合物结合，N-端与TFⅡF协同作用募集RNA聚合酶II TFIIB与TFIID结合，并为RNA聚合酶结合起一个桥梁作用。;（4）与RNA聚合酶与TFIIF相连的复合体结合;（5）TF II E 扩大DNA覆盖区至+30;（6）TF II H 和TF II J加入复合物;（7）TF II H 有多种酶活性，包括A