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细胞工程总复习 绪论 细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。 细胞工程的内容：按照细胞工程操作的对象可以分为动物细胞工程、植物细胞工程和微生物细胞工程。 染色体工程 一、定义:是人们按照一定的设计、有计划的消减、添加或代换同种或异种染色体的技术。 二、内容： 1、人工诱导多倍体 2、人工诱导雌雄核发育 3、性别控制 染色体工程 多倍体：由Winkler于1916年首次使用的，是指每个体细胞中含有三个或更多染色体组的个体。 多倍体现象在植物中是非常多的，1/3的被子植物都是多倍体，例如三倍体的无籽西瓜（无籽），香蕉，杜鹃花（花期长），甜菜（耐寒）和六倍体的小麦（高产）等；但在动物中却少得多，典型的就是黑龙江流域的银鲫的某些种群为天然三倍体。 染色体工程 为什么要研究人工诱导多倍体？ 1、绝大多数的多倍体动物，如两栖类动物、鱼类、贝类都具有生长速度快，个体大，成活率高，抗病能力强等优点。 2、诱导三倍体可以增加种间杂交的成功率。低等动物的种间杂交优势非常明显：一般来说，种间杂种生长快，可以同时具有两个不同品种的优良特性，而种间杂交所获得的二倍体生存率低，通过人工的方法诱导种间的三倍体，获得后代的成活率较高。 3、三倍体动物不育性的利用： 三倍体一般是不育的，可以利用这一特性，将消耗于生殖腺的能量用于动物生长上，缩短了养殖周期，减少了养殖成本，可以养殖大型个体。 4、利用四倍体和二倍体的杂交获得不育的三倍体：这是产生三倍体的最好方法，例如无籽西瓜就是这样生成的。 染色体工程 多倍体诱导的方法： 1、生物学方法：利用种间的杂交来获得异源多倍体 2、物理学方法： （1）温度休克法：包括冷休克法（0—5℃）和热休克法（30℃）； （2）水静压法：一般采用较高的水静压（65kg/cm2）来抑制第二极体的放出或第一次卵裂产生多倍体。 3、化学方法： （1）细胞松弛素B ：抑制微丝的聚合，导致细胞质的分裂不能完成。（2）秋水仙碱：抑制细胞分裂中纺锤丝的形成，因而抑制了有丝分裂。 染色体工程 多倍体鉴定的方法 1、核体积测量； 2、色染体计数； 3、DNA含量测定； 4、蛋白质电泳和生化分析。 染色体工程 雌核发育：俗称假受精，精子虽正常地钻入和激活卵子，但精子的细胞核并未参与卵球的发育，精子的染色体很快消失，胚胎的发育仅在母体遗传控制下进行。 孤雌生殖：也称单性生殖，即卵不经过受精也能发育成正常的新个体。 人工诱导雌核发育，鉴定。 意义和应用： 1、在生产上应用； 2、用于生产单性群体； 3、在育种上有重要的应用； 4、研究中应用。 染色体工程 动物性别控制：是指通过人为的干预或操作，使动物按照人们的愿望繁殖出所需性别的后代的技术。 意义：1、提高畜牧业的经济效益；2、消灭不理想的隐性性别。 动物性别控制的途径： 1、分离XY精子（根据XY精子的不同之处、DNA量的差别、H－Y抗原）：流式细胞仪、免疫亲和层析；2、鉴定胚胎性别：核型分析、生物化学微量分析法、免疫学方法、分子生物学方法。3、控制发育的条件：温度和激素；4、控制受精条件：调整pH值、激素；5、性反转法。 第四章：细胞拆合与重组 第四章：细胞拆合与重组 基本概念 1、显微操作仪：是一种用来在显微镜下对细胞进行细微手术和注射的装置，可用于细胞核移植，基因注入，胚胎切割等。 2、克隆(clone)：指遗传上完全相同的子细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖个体。在不发生突变的情况下，他们应有相同的遗传结构 3、克隆（cloning）：通过克隆的方式来生产克隆群体的过程或手段 4、克隆动物：通过克隆的方式所获得的动物。 5、细胞的全能性：是指已分化的细胞和尚未分化的细胞具有发育成完整有机体的各种组织的潜在能力的性质。生物体中的一个体细胞或一个生殖细胞在一定条件下，有能力重新形成完整的个体，或者分化形成该个体任何种类的细胞。 第四章：细胞拆合与重组 哺乳动物的克隆方法 1、胚胎分割 2、用胚胎细胞生产克隆动物 3、利用干细胞生产克隆动物 4、体细胞克隆 第四章：细胞拆合与重组 体细胞克隆的基本过程： 1、核供体细胞的获得；2、去核卵母细胞的获得；3、电融合；4、移植至中间受体中培养至囊胚；5、移至假孕母羊体内；6、出生 意义： （一）生物学意义：验证了细胞的全能性，证实了已分化的细胞仍具有全部基因，能够维持细胞到个体发育的整个过程 （二）生产实践意义 1、加快优良畜种的繁育改良过程；2、生产实验动物；3、生产转基因动物；4、扩大转基因动物的效应； 5、生产人的胚胎干细胞；6、复制濒危