土壤铵态氮的测定.docxVIP

土壤铵态氮的测定 一、方法原理 土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分，测定土壤 NH  4 + -N 的方法主要 有直接蒸馏法和浸提法两类，直接蒸馏法是在氧化镁的存在下直接蒸馏土壤， 但此法在弱碱性蒸馏时仍可能使一些简单的有机氮微弱水解有 NH3 蒸出，易使 结果偏高，同时该法操作复杂，不适合大批量分析。故在 ASI 法中采用氯化钾 溶液提取土壤中的 NH4+，提取液中的 NH4+用靛酚蓝比色法，靛酚蓝比色法的 灵敏度高，准确度也较高，适合于大批量样品的自动化分析。 靛酚蓝比色法的基本原理是：土壤胶体上的 NH4+被 K+交换下来后，在强 碱性介质中与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性染料靛酚蓝，其深浅与溶液中 的 NH4+-N 含量呈正比，线性范围为 0.05～0.5mg/L 之间。 二、试剂配制 1. NaOH 溶液 将 6.75g NaOH、0.75g EDTA 二钠、1.25g 醋酸钠溶解于 250ml 水中，储存于 250ml 的容量瓶中。其中 EDTA 二钠作为金属离子的掩蔽剂，防止干扰。醋酸 钠可增强颜色的稳定性。 2. 90%苯酚溶液 将 45g 苯酚溶解于 50ml 水中，注意苯酚易结块，可加热到 60-70℃。 3. 碱性苯酚溶液 测定当天，将 36ml 90%苯酚溶液加到 250ml 溶液中，摇匀。 4. 次氯酸钠溶液 在 400ml 的水中加入 100ml 的 NaClO 溶液即可。 5. NH4+-N 标准溶液的配制(改进的地方) 称取 1.9105g NH4Cl（65℃烘 4h），于 500ml 的容量瓶中，加水定容至刻度。 该溶液的浓度为 1000mg/L. 用移液管吸取 1ml 于 100ml 的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，此时 容量瓶中溶液浓度为 10mg/ml。再对该溶液分别取 0，0.5，1，2，4，8ml 于 25ml 的比色皿中，，对应的浓度为 0.0， 0.2，0.4, 0.8, 1.6，3.2 ppm(mg/L). 6. 浸提剂 KCl 溶液的配制 称取 74.5g KCl 溶解于 500ml 水中，并加 0.25g 聚丙烯酰胺至 1000ml 容量 瓶中。为 1mol/L 的溶液。 三、操作步骤 1. 样品的处理：用电子分析天平称取约为 2.000g 土样于锥形瓶中，加入 40ml 的 KCl 溶液，放于振荡机上，振荡 1h，将其过滤于 50ml 的容量瓶中，同时做 空白试验。 2. 向有一定量的 NH4+-N 溶液中加入 4ml 碱性苯酚溶液，再用加液器加入 10ml 次氯酸钠溶液，用 KCl 滴至刻度线，摇匀，放置 1h 后，用分光光度计在 630nm 处比色，读取吸光度 A。 3. 标准曲线的绘制：从浓度为 0.0， 5.0， 10.0, 20.0, 40.0 ppm(ug/mL)的 NH4+-N 标准溶液中各取 1.0ml 的溶液于 25ml 的比色管中，补加 KCl 溶液至 10.0ml,然后按步骤 2 进行操作。 四、比色条件： 碱性介质中反应，要求 pH 10.5-11.7。 显色和稳定时间： 在室温下（20?C）一般显色时间约为 1 小时，但要完全显色约需 2-3 小时， 所以加入试剂后静置 1 小时即可比色。 稳定时间为 24 小时，或 24 小时以上。为加速显色，也可在 40?C下加热， 半小时即可显色。 （3）干扰离子： 因在碱性下显色，很多金属离子都有干扰，可用 EDTA 等螯合剂来掩蔽。 测定范围：0.05-0.5mg/L； 比色波长：625nm。 五、评价 优点：兰色稳定，比色液为真溶液，灵敏度高；准确度、精密度高；干扰离子 可用 EDTA 掩蔽。 缺点：试剂不稳定，须冷藏，或当天配制；试剂有毒；显色时间稍长。