公司工厂无菌检查法.docxVIP

文件编号 无 菌 检 查 法 颁发部门 XXXXXXX/X 总页数 执行日期 编制者 审核者 批准者 编制日期 审核日期 批准日期 目的：建立对成品无菌检查的标准操作规程。 2.范围：对成品的无菌检查。 3.责任：质量监督部。 4.内容： 4.1概述：无菌检查是检查药品与敷料是否染有活菌的一种方法。无菌检查的操作环境和全部过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，同时也应避免在有抑菌条件下操作。 4.2仪器、设备和用具： 4.2.1无菌室分无菌操作室和缓冲间。在缓冲间内应有洗手盆、干手器、无菌衣裤放置架及挂钩、拖鞋等。无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局部洁净度100级或放置同等级别的超净工作台。室内温控（25＋2）℃及除湿装置。缓冲间及操作室内均设置能达到空气消毒的紫外光灯和照明灯，操作室或工作台应保持空气正压。 4.2.1.1无菌室应每周和每次操作前用0.1％新洁尔灭或2％甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，开动无菌空气过滤器及紫外光灯杀菌1小时。在每次操作完毕，同样用2％甲酚或0.1％新洁尔灭溶液擦拭工作台面，除去室内湿气，用紫外光灯杀菌半小时。 4.2.1.2无菌室的无菌程度检查：无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数。取直径90mm双碟，在接种室内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将双碟半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml，制成平板：在35-37℃预培养48小时，证明无菌后将3个平板以无菌方式带入无菌操作间的洁净区域左、中、右各放1个；打开碟盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将盖盖好，置35-37℃培养48小时，取出检查，3个平板上生长的菌落数相加总数不得超过10个。 无菌操作台面或超净工作台应定期请有关部门检测其洁净度，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪），检测尘埃粒径≤5μm的粒数不得超过3.5个／升；空气流量应控制在0.75-1.0m3 4.2.1.3无菌室内应准备好盛有消毒用5％甲酚的玻璃缸、酒精灯、火柴、镊子、75％酒精棉、碘酒棉及拖鞋等。 4.2.2恒温培养箱及可调20-25℃的生化培养箱。 4.2.3离心机、显微镜、高压消毒炉、标准pH比色器（0.02酚红指示剂和溴钾酚蓝指示剂）、恒温烤箱。 4.2.4玻璃器皿：试管、量筒、三角瓶、移液管、刻度吸管（1.5.10ml）、注射器（2.5.10ml）、双碟等，用玻璃洗涤剂或清洁液浸泡，水洗3次。使用过后如与细菌接触，应先消毒倒出内容物后再清洗，晾干。凡无菌操作过程中所用的器皿，都应包扎严密，121℃灭菌30分钟。 4.2.4.1移管、刻度吸管在管口上端内，松松地塞入少许棉花，然后放于吸管筒内或牛皮纸袋内，盖严，消毒备用。 4.2.4.2试管、离心管、三角瓶等在管（瓶）口塞上海棉胶专用塞或纱布棉塞，塞子应塞进管口内2／3处，用牛皮纸将管口（包括塞子）包扎严，消毒备用。 4.2.4.3注射器、针头（9号、11号、12号）：将注射器与针头配对，先试验抽气、排气是否畅通后，将注射芯、管和针头分别放在双层纱布（或布）内，包扎严密，置带盖容器（瓷盘或铝制饭盒）内，盖严，用牛皮纸包扎，消毒备用。 4.2.5无菌衣、裤、帽、口罩等洗净晾干，配套，用牛皮纸包严，消毒备用或用一次性的物品代替。 4.2.6长柄取样匙，放于长的玻璃筒（或不锈钢长筒内），盖严，干热灭菌备用。 4.2.7手术镊、手术剪洗净，擦干。用双层纱布将1把剪刀与1个镊子间隔包扎在一起，放于带盖的容器（瓷盒或铝制饭盒）内，盖严，用牛皮纸包扎，灭菌备用。 4.2.8用具的灭菌：将包扎妥的用具(另有规定除外），在(121±0.5）℃蒸气灭菌30分钟，物品取出时切勿立即置冷处，以免急速冷却，使灭菌物品内蒸气冷凝造成负压，易致染菌，应置恒温培养箱中烘干。适于高温灭菌的器皿也可采用160℃干热灭菌2小时。 4.3试液： 4.3.1 75％乙醇溶液配制酒精棉球用。 4.3.2 碘酊溶液配制碘酒棉球用。 4.3.3 灭菌生理盐水0.9％氯化钠溶液，分装于试管或三角瓶中，瓶口用棉塞或海棉胶专用塞塞紧并用牛皮纸包扎，灭菌备用。 4.3.4 新洁尔尔灭（1:1000）溶液。 4.3.5 3-5％甲酚溶液。 4.3.6 0.02％酚红指示剂pH6.8-8.4系列比色液管。 4.3.7 溴钾酚蓝指示剂pH6.0-7.6系列比色液管。 4.3.8 2mol／L盐酸溶液。 4.3.9 2mol／L氢氧化钠溶液。 4.4 培养基： 4.4.1一般采用商品干燥培养基，临用时按照使用说明书进行配制，需注意培养基的pH值应符合规定，否则必须校正后，灭菌使用。 4.4.2新鲜配制的培养基，应按中国药典规定的处方，对培养基原材料要进行挑选，化学药品均需用CP试剂规格。 4.4.2.1除葡萄糖和指示