第二章细胞生物学研究方法.pptxVIP

;表一、几种介质的折射率;(二)荧光显微镜:;荧光显微镜的应用 定性、定位和定量的研究组织内的荧光标记物质。 对活细胞内分子的动态变化进行实时观察。 ; ;相差显微镜观察培养中的HeLa细胞;(四)暗视野显微镜通过散射光成像;(五)显微电影摄影技术记录细胞或细胞器的运动过程 原理：用显微电影摄影术或电视录像以一定时间间隔拍摄。 应用：准确记录细胞或细胞器的运动过程和速度。 ;（六）共聚焦激光扫描显微境 Laser confocal scanning microscope, LCSM;普通荧光显微镜（a）与激光共聚焦显微镜（b）的成像比较; 二、电子显微技术; ;透射电镜及其图像;（二）扫描电子显微镜SEM;扫描电镜及其图像; ;;;疟疾破坏的两个红细胞;显微镜; ; 细胞分离方法;(一)离心方法 利用细胞的密度特性可有效分离不同的细胞。 如血浆白细胞和红细胞的分离。 ; ; ; ; 二、细胞培养;;2.细胞培养的主要方式是原代培养和传代培养 原代培养（primary culture）：直接从体内获取的组织和细胞进行的首次培养。 传代培养（secondary culture）：原代培养的细 胞经过增殖达到一定密度后，将细胞分散，从一个培养器以一定比例移到另一个或几个容器中的扩大培养。;3.来源于体内的细胞可在体外建系（细胞系） 细胞系（cell line）：在培养的细胞中产生“不死”的 变异细胞，这种细胞可以无限繁殖、传代。 细胞系的来源 取材于肿瘤组织的原代培养细胞（Hela细胞系） 培养过程中发生转化的正常细胞; ;单克隆抗体技术 正常淋巴细胞（如小鼠脾细胞）具有分泌抗体的能力，但不能长期培养，瘤细胞（如骨髓瘤）可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖。;第三节 细胞组分的分离;一、细胞裂解; ;; ; 本章重点