HIV病毒检测方法及其检测试剂盒.docVIP

(54)发明名称 HIV病毒RT-LAMP-LFD检测方法及其检测试剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种HIV病毒RT-LAMP-LFD检测试剂盒及其检测方法。该检测方法是根据GenBank公布的HIV病毒序列的保守区域设计HIV RT-LAMP-LFD反应系统所需引物与探针;采用本发明人配制的RNA提取试剂提取HIV病毒RNA，使用本发明建立的RT-LAMP反应体系进行检测，依据反应体系加入的检测探针，在反应结束后利用核酸快速检测试纸判定结果。同现在HIV病毒的常用检测技术相比，本发明有助于实现早期诊断，避免漏检，有助于提高检测的灵敏性、缩短检测时间，是HIV诊断方法持续发展的主要方向。 1.一种HIV病毒RT-LAMP-LFD检测方法，其特征在于包括如下步骤: （HIV病毒）RNA的提取: (1)取20-35mg含有HIV病毒的血液组织，加入300-500u L裂解液匀浆，离心; (2)取步骤(1)离心所得上清液，与等体积的70%无水乙醇混合均匀后，将混合液与玻 璃纤维素膜结合; (3)依次用去蛋白液和漂洗液洗涤玻璃纤维素膜; (4)用RNase free water洗脱玻璃纤维素膜上吸附的RNA; (5)配制预反应液，所述预反应液体积为15-20 u L，包括:1.5-2.0mmol /L引物HIV-FIP,1.5-2.0mmol/L引物HIV-BIP,0.2mmol/I引